PPARγ及其配體在大鼠氣道黏液高分泌中的作用及分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討丙烯醛誘導(dǎo)大鼠氣道黏液高分泌發(fā)生的機(jī)制；了解PPARγ及其配體對(duì)氣道黏液高分泌過(guò)程的調(diào)控作用；探討PPARγ及其配體參與氣道黏液高分泌調(diào)控的分子機(jī)制。 方法:大鼠霧化吸入丙烯醛建立氣道黏液高分泌模型(丙烯醛3.0μg/ml、6小時(shí)/天，連續(xù)12天)。干預(yù)組霧化吸入丙烯醛同時(shí)分別給予羅格列酮2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg管喂。提取支氣管肺組織，采用HE染色及AB-PAS染色方法了解支氣管肺組織的病理改變和氣道杯

2、狀細(xì)胞增生情況；收集支氣管肺泡灌洗液，采用ELISA法檢測(cè)BALF中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α水平；應(yīng)用熒光定量RT-PCR、免疫組織化學(xué)法及Western blot方法檢測(cè)氣道粘蛋白Muc5ac、PPARγ及NF-кB、I-кB等的表達(dá)水平。 結(jié)果:丙烯醛刺激導(dǎo)致大鼠氣道上皮Muc5ac mRNA和蛋白表達(dá)增高，支氣管肺泡灌洗液中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α水平增高，同時(shí)氣道上皮細(xì)胞NF-кB

3、表達(dá)和NF-кB入核率增加，I-кB表達(dá)下降。相關(guān)性分析顯示氣道上皮細(xì)胞NF-кB的活化、BALF中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α水平與Muc5ac mRNA表達(dá)分別呈正相關(guān)。羅格列酮能上調(diào)PPA2Rγ mRNA和PPARγ蛋白的表達(dá)，并以濃度依賴性方式抑制丙烯醛所致的氣道上皮Muc5ac表達(dá)增高，下調(diào)BALF中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α水平，同時(shí)抑制氣道NF-кB的活化及I-кB的降解。相關(guān)性分析顯示氣