細(xì)胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢中的表達(dá)及其生物學(xué)意義.pdf

1、目的研究細(xì)胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢顆粒細(xì)胞中的表達(dá)水平，探討細(xì)胞色素P450芳香化酶與多囊卵巢綜合征發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為進(jìn)一步闡明PCOS的發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。方法采用孕激素聯(lián)合HCG法建立多囊卵巢綜合征大鼠模型。(1)運(yùn)用化學(xué)發(fā)光免疫方法測定大鼠血清中睪酮(T)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)的含量；(2)運(yùn)用T/A克隆將RT-PCR擴(kuò)增片段連接載體，并進(jìn)行測序分析。(3)應(yīng)用半定量RT-PCR檢測PCOS組及

2、正常組大鼠卵巢組織中細(xì)胞色素P450芳香化酶基因(CYP19)的表達(dá)水平；(4)采用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(SP)法對(duì)大鼠卵巢組織中細(xì)胞色素P450芳香化酶進(jìn)行檢測；結(jié)果(1)PCOS組血清中T、FSH含量較正常組升高；(2)RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測序分析，結(jié)果與GeneBank中CYP19cDNA序列比對(duì)，完全一致。(3)PCOS組和正常組卵巢組織中CYP19基因表達(dá)水平，經(jīng)半定量分析，相對(duì)表達(dá)強(qiáng)度分別為(0.138±0.07

3、2)和(0.759±0.236)，差別有顯著性意義(P＜0.01)；(4)免疫組化結(jié)果：模型組與正常組之間比較，原始卵泡、初級(jí)卵泡和成熟卵泡細(xì)胞色素P450芳香化酶蛋白表達(dá)下降(P＜0.05)。模型組各級(jí)卵泡間比較表達(dá)無顯著性差異，在正常對(duì)照組內(nèi)，初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡和成熟卵泡比較，芳香化酶蛋白表達(dá)有顯著性差異(P＜0.05)結(jié)論細(xì)胞色素P450芳香化酶mRNA在PCOS大鼠卵巢組織中呈低表達(dá)；細(xì)胞色素P450芳香化酶蛋白在PCOS大鼠卵