加減歸腎丸對(duì)大鼠乳腺發(fā)育不良的干預(yù)作用及機(jī)理研究.pdf

1、目的:
　　乳腺發(fā)育不良是臨床常見(jiàn)的現(xiàn)代乳腺疾病，歷代中醫(yī)古籍記載甚少。目前，女性乳腺發(fā)育不良的患病率逐漸升高并趨于年輕化，該病不但影響美觀，而且可能影響女性身心健康及日后的哺乳功能。祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在乳腺發(fā)育不良疾病方面做了大量研究，但目前依然沒(méi)有有效且安全的治療乳腺發(fā)育不良的方法或產(chǎn)品。
　　加減歸腎丸是由補(bǔ)腎經(jīng)典方歸腎丸化裁而成，針對(duì)腎氣虧虛、精血不足證具有良好療效的臨床經(jīng)驗(yàn)方，但目前尚無(wú)相關(guān)的機(jī)理研究。本課題在

2、對(duì)乳腺發(fā)育不良中醫(yī)病機(jī)再認(rèn)識(shí)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)方法，在建立乳腺萎縮大鼠模型的基礎(chǔ)上，研究加減歸腎丸對(duì)模型大鼠乳頭直徑和高度、體重、動(dòng)情周期、性激素水平、子宮、脾及腎臟器系數(shù)、乳腺組織病理形態(tài)學(xué)的影響，以及對(duì)大鼠乳腺組織ERα和PR基因表達(dá)的影響，旨在考察加減歸腎丸對(duì)大鼠乳腺發(fā)育不良的作用，并初步探討其作用機(jī)理。
　　方法:
　　以48只雌性青春期SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用經(jīng)典去卵巢術(shù)成功建立大鼠乳腺萎縮動(dòng)物模型后

3、，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性藥組和加減歸腎丸高、中、低劑量組，每組8只，分別進(jìn)行灌胃給藥干預(yù)30d后，考察各組大鼠一般狀態(tài)、動(dòng)情周期及體重變化，子宮、脾和腎上腺臟器系數(shù)的變化;酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)血清雌二醇(Estradiol;E2)、孕酮(progesterone;P)含量;RT-PCR法檢測(cè)乳腺組織雌激素受體α(Estrogen receptor-α;ERα)、孕激素受體(Progesterone receptor;PR)受體基因表

4、達(dá)情況;觀察大鼠乳頭直徑和高度及乳腺組織病理變化。
　　結(jié)果:
　　1.乳腺萎縮動(dòng)物模型:摘除大鼠雙側(cè)卵巢可以成功復(fù)制大鼠乳腺萎縮模型，該模型大鼠表現(xiàn)出毛發(fā)枯槁、急躁、較難抓取等明顯腎陰虛體征，與假手術(shù)組比較，造模14天時(shí)體重呈明顯上升趨勢(shì)(P＜0.05)，動(dòng)情期天數(shù)顯著縮短（P＜0.01），動(dòng)情間期顯著延長(zhǎng)(P＜0.01)，血清中E2、P含量顯著降低（P＜0.01）。
　　2.大鼠一般狀態(tài)及動(dòng)情周期、體重的變化:給藥

5、后，與模型組比較，加減歸腎丸中、低劑量可明顯改善大鼠毛發(fā)枯槁及脫毛現(xiàn)象，大鼠容易抓取，隔離攻擊實(shí)驗(yàn)記分均顯著減小(P＜0.01)，且給藥20天后能顯著降低大鼠體重(P＜0.01)，并顯著提高大鼠規(guī)律動(dòng)情周期數(shù)目（P＜0.01）。
　　3.臟器系數(shù)的變化:模型組大鼠子宮、腎上腺臟器系數(shù)及子宮攝水量與假手術(shù)組比較顯著降低(P＜0.05)。經(jīng)藥物干預(yù)后，陽(yáng)性藥及加減歸腎丸中劑量可不同程度上調(diào)模型大鼠子宮、腎上腺系數(shù)及子宮攝水量（P＜0.

6、01，P＜0.05），但對(duì)大鼠脾臟系數(shù)無(wú)明顯影響(P＞0.05)。
　　4.血清性激素變化:與假手術(shù)組比較，模型大鼠血清E2、P水平均顯著降低(P＜0.05)，給藥干預(yù)后陽(yáng)性藥及加減歸腎丸低、中劑量均能上調(diào)模型大鼠血清E2、P水平(P＜0.01，P＜0.05)。
　　5.ERα和PR基因表達(dá)變化:陽(yáng)性藥及加減歸腎丸低、中劑量組大鼠乳腺組織中ERα基因表達(dá)較模型組均有顯著性增高（P＜0.01，P＜0.05），而陽(yáng)性藥對(duì)大鼠PR

7、基因表達(dá)無(wú)明顯影響，加減歸腎丸低、中劑量組可顯著增高模型大鼠PR基因表達(dá)(P＜0.01，P＜0.05)。
　　6.乳腺組織形態(tài)學(xué)變化:陽(yáng)性藥及加減歸腎丸低、中劑量組較模型組均可顯著增加大鼠乳頭直徑和高度(P＜0.01);在改善大鼠乳腺組織結(jié)構(gòu)方面，加減歸腎丸低、中劑量治療組可明顯改善模型組大鼠乳腺萎縮的狀態(tài):乳腺腺體數(shù)目增多，腺管腔、腺泡腔變大，結(jié)締組織疏松，且無(wú)乳腺增生現(xiàn)象出現(xiàn);而陽(yáng)性藥雖能改善大鼠乳腺萎縮的狀態(tài)，但部分大鼠出現(xiàn)

8、乳腺組織纖維化。
　　結(jié)論:
　　1.加減歸腎丸在一定劑量下可顯著改善模型大鼠動(dòng)情周期紊亂的狀態(tài)，且能緩解模型大鼠毛發(fā)枯槁、急躁、易激惹腎陰虛癥狀，并抑制模型大鼠體重的代償性增加，改善大鼠的肥胖。
　　2.加減歸腎丸治療大鼠乳腺發(fā)育不良的療效從整體上優(yōu)于雌激素制劑戊酸雌二醇，但在改善大鼠體重和提高E2、P水平方面同戊酸雌二醇相當(dāng)，且能有效抑制模型大鼠子宮和腎上腺的萎縮。
　　3.加減歸腎丸可全面上調(diào)大鼠乳腺組織E