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1、目的本研究擬通過綜述中醫(yī)學(xué)對(duì)男性不育癥的認(rèn)識(shí)與治療現(xiàn)狀以及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展,并根據(jù)當(dāng)前男性不育癥治療難點(diǎn)以及中醫(yī)藥治療優(yōu)勢(shì),結(jié)合導(dǎo)師臨床經(jīng)驗(yàn),選用腺嘌呤所致腎陽(yáng)虛型生精細(xì)胞損傷動(dòng)物模型,同時(shí)以臨床驗(yàn)證有效的補(bǔ)腎生精丸(BushenShengjingPill,簡(jiǎn)稱BS)為治療藥物,探討B(tài)S對(duì)腎陽(yáng)虛型生精細(xì)胞損傷模型大鼠的作用機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組及給藥:選用3個(gè)月齡SD雄性大鼠96只,隨
2、機(jī)分為正常組、模型組、BS高劑量組和低劑量組,每組24只??瞻捉M:喂飼0.5%羧甲基纖維素鈉,10mL/kg;模型組:喂飼腺嘌呤溶液250mg/kg;BS高低劑量組:首先分別喂飼BS混懸液400mg/kg和100mg/kg,40分鐘后喂飼腺嘌呤溶液250mg/kg,實(shí)驗(yàn)總持續(xù)時(shí)間均為40d。各組動(dòng)物分別在開始給藥的第20d、30d和40d各取8只,于末次給藥1h后在安靜狀態(tài)下用10%水合氯醛麻醉,剖腹取腹主動(dòng)脈血分離血清采用酶免法檢測(cè)實(shí)
3、驗(yàn)動(dòng)物血清生殖內(nèi)分泌激素變化;取出右側(cè)睪丸用10%甲醛液固定,在光學(xué)顯微鏡下觀察睪丸組織形態(tài)學(xué)改變;離斷右側(cè)附睪組織進(jìn)行精子活動(dòng)率、精子計(jì)數(shù)觀察;取左側(cè)睪丸采用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)睪丸組織超氧化物歧化酶(SOD)、采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定丙二醛(MDA)含量;采用硝酸還原酶法檢測(cè)一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)含量;用TUNEL法檢測(cè)生精細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)第20d模型精子活動(dòng)率、精子計(jì)數(shù)、FSH、LH
4、、T值、SOD活性及MDA含量、NOS活性及NO含量與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,可以判定實(shí)驗(yàn)第20d造模沒有成功。實(shí)驗(yàn)第30d模型組各項(xiàng)指標(biāo)與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,BS高劑量組和低劑量組各項(xiàng)指標(biāo)均與模型組和正常組具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,且BS高劑量組優(yōu)于BS低劑量組。實(shí)驗(yàn)第40d模型組各項(xiàng)指標(biāo)與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,BS高劑量組和低劑量組各項(xiàng)指標(biāo)與模型組比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但療效和作用機(jī)制指標(biāo)沒有比3
5、0d明顯,表明實(shí)驗(yàn)第40d模型組大鼠生精細(xì)胞損傷嚴(yán)重。 結(jié)論 腺嘌呤能夠使模型大鼠出現(xiàn)綣臥、反應(yīng)遲鈍等類似腎陽(yáng)虛的癥狀;能夠使模型大鼠精子活動(dòng)率下降,生殖腺臟器系數(shù)改變;能夠使模型大鼠睪丸曲細(xì)精管萎縮,管腔內(nèi)上皮變薄等組織形態(tài)學(xué)改變。腺嘌呤能夠使模型大鼠血清T、LH值降低;睪丸組織NOS活性及NO含量增高;SOD活性降低,MDA含量增高;生精細(xì)胞凋亡明顯增強(qiáng)。BS可顯著提高腎陽(yáng)虛型生精細(xì)胞損傷模型大鼠的精子數(shù)量和質(zhì)量,改
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