丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備技術(shù)及體內(nèi)外特性研究.pdf

1、依據(jù)丹酚酸B的生物藥劑學(xué)特點(diǎn)，本文設(shè)計(jì)并優(yōu)化了丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備工藝，并深入地研究了其物理、化學(xué)和生物學(xué)特性，并將這些性質(zhì)與丹酚酸B作比較，以證實(shí)丹酚酸B磷脂化后是否有增加口服吸收。具體研究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)部分：
　　 一、丹酚酸B的有關(guān)性質(zhì)研究
　　 (1)建立了準(zhǔn)確、高效的丹酚酸B的含量測(cè)定方法，色譜條件為：色譜柱：YMC-PACK ODS-A柱(250×4.6)，流動(dòng)相：甲醇：乙腈：1.67％甲酸(30：10

2、：60)，流速：1.0ml/min，檢測(cè)器波長(zhǎng)：280nm，進(jìn)樣量：10μl，理論塔板數(shù)按丹酚酸B計(jì)算不低于3000。
　　 (2)性質(zhì)研究表明丹酚酸B屬于易溶性藥物，其表觀油水分配系數(shù)為4.41，并在酸性環(huán)境下最穩(wěn)定，24h后幾乎不降解，在水中也比較穩(wěn)定，24h降解約5％左右，但其在pH7.4PBS中不穩(wěn)定，可能與緩沖液成鹽，24h降解了37％。
　　 二、丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備及工藝優(yōu)化
　　 (1)在優(yōu)化

3、丹酚酸B磷脂復(fù)合物制備條件的系統(tǒng)研究中，首先確定建立了能合理、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)丹酚酸B磷脂復(fù)合物制備條件的標(biāo)準(zhǔn)即結(jié)合率，繼而考察反應(yīng)溶劑、丹酚酸B與磷脂的投料比、反應(yīng)物濃度、反應(yīng)時(shí)間及反應(yīng)溫度等因素對(duì)結(jié)合率的影響，進(jìn)而采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)行反應(yīng)條件的優(yōu)化并驗(yàn)證工藝。最佳工藝為：以四氫呋喃為溶劑，每1g丹酚酸B其用量為20ml，磷脂與丹酚酸B的投料量比為2：1，40℃溫度下反應(yīng)時(shí)間為1.5h。
　　 (2)建立簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的HPLC法對(duì)丹酚酸B

4、磷脂復(fù)合物中丹酚酸B的含量進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算載藥量和包封率。
　　 (3)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，減少勞動(dòng)強(qiáng)度，增加效率。
　　 三、丹酚酸B磷脂復(fù)合物理化性質(zhì)的研究
　　 (1)通過(guò)顯微系統(tǒng)觀察磷脂復(fù)合物的基本形態(tài)，可知磷脂復(fù)合物包合完整，且較為圓整；薄層鑒別結(jié)果顯示，磷脂與丹酚酸B鍵合完全。而DSC實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，形成的丹酚酸B磷脂復(fù)合物后，其熱力學(xué)性質(zhì)發(fā)生了根本變化；粒徑測(cè)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，丹酚酸B磷脂復(fù)合物的平均粒徑

5、為103.5nm，基本符合復(fù)合物粒徑大小的要求，粒徑分布基本符合正態(tài)分布。以上理化性質(zhì)表明丹酚酸B磷脂復(fù)合物鍵合完全。
　　 (2)通過(guò)對(duì)丹酚酸B及其磷脂復(fù)合物中丹酚酸B的溶解度和油/水表觀分配系數(shù)的測(cè)定可知：磷脂的鍵合使得丹酚酸B在水中的溶解度有所下降，但仍能溶解；而丹酚酸B磷脂復(fù)合物較丹酚酸B在三種介質(zhì)(水溶液、0.1mol/LHC1溶液、pH7.4PBS液)中的油水分配系數(shù)分別提高了8.94，18.05和6.16倍。對(duì)丹酚

6、酸B及其磷脂復(fù)合物在三種介質(zhì)中穩(wěn)定性的考察結(jié)果顯示：與丹酚酸B的穩(wěn)定性相比，丹酚酸B磷脂復(fù)合物在酸性、中性和偏堿性環(huán)境下的穩(wěn)定性都有提高，尤其在pH7.4PBS液中的穩(wěn)定性大大提高，24h僅僅降低了1.1％。以上理化性質(zhì)的改變都提示丹酚酸B磷脂化后有利于藥物的口服吸收。
　　 四、丹酚酸B與其磷脂復(fù)合物在SD大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　 (1)建立了準(zhǔn)確、可靠、簡(jiǎn)便的大鼠血漿中丹酚酸B含量的測(cè)定方法。色譜條件為：色譜柱為

7、Venus11XBP-C18柱(250mm×4.6mm)，有預(yù)柱，流動(dòng)相：甲醇：乙腈：1.67％甲酸(30:10:60)，流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)器波長(zhǎng)：280nm，進(jìn)樣量：10μl。
　　 (2)將大鼠隨機(jī)分組分別灌胃丹酚酸B與丹酚酸B磷脂復(fù)合物2 g/kg，HPLC測(cè)定不同時(shí)間間隔的血藥濃度，運(yùn)用DAS1.0藥動(dòng)學(xué)程序計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果丹酚酸B磷脂復(fù)合物的相對(duì)生物利用度為162.80％。表明丹酚酸B磷脂