丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備技術(shù)及體內(nèi)外特性研究.pdf

1、依據(jù)丹酚酸B的生物藥劑學(xué)特點，本文設(shè)計并優(yōu)化了丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備工藝，并深入地研究了其物理、化學(xué)和生物學(xué)特性，并將這些性質(zhì)與丹酚酸B作比較，以證實丹酚酸B磷脂化后是否有增加口服吸收。具體研究內(nèi)容包括以下幾個部分：
　　 一、丹酚酸B的有關(guān)性質(zhì)研究
　　 (1)建立了準確、高效的丹酚酸B的含量測定方法，色譜條件為：色譜柱：YMC-PACK ODS-A柱(250×4.6)，流動相：甲醇：乙腈：1.67％甲酸(30：10

2、：60)，流速：1.0ml/min，檢測器波長：280nm，進樣量：10μl，理論塔板數(shù)按丹酚酸B計算不低于3000。
　　 (2)性質(zhì)研究表明丹酚酸B屬于易溶性藥物，其表觀油水分配系數(shù)為4.41，并在酸性環(huán)境下最穩(wěn)定，24h后幾乎不降解，在水中也比較穩(wěn)定，24h降解約5％左右，但其在pH7.4PBS中不穩(wěn)定，可能與緩沖液成鹽，24h降解了37％。
　　 二、丹酚酸B磷脂復(fù)合物的制備及工藝優(yōu)化
　　 (1)在優(yōu)化

3、丹酚酸B磷脂復(fù)合物制備條件的系統(tǒng)研究中，首先確定建立了能合理、準確評價丹酚酸B磷脂復(fù)合物制備條件的標準即結(jié)合率，繼而考察反應(yīng)溶劑、丹酚酸B與磷脂的投料比、反應(yīng)物濃度、反應(yīng)時間及反應(yīng)溫度等因素對結(jié)合率的影響，進而采用正交設(shè)計試驗進行反應(yīng)條件的優(yōu)化并驗證工藝。最佳工藝為：以四氫呋喃為溶劑，每1g丹酚酸B其用量為20ml，磷脂與丹酚酸B的投料量比為2：1，40℃溫度下反應(yīng)時間為1.5h。
　　 (2)建立簡便準確的HPLC法對丹酚酸B

4、磷脂復(fù)合物中丹酚酸B的含量進行測定，并計算載藥量和包封率。
　　 (3)改進實驗方法，減少勞動強度，增加效率。
　　 三、丹酚酸B磷脂復(fù)合物理化性質(zhì)的研究
　　 (1)通過顯微系統(tǒng)觀察磷脂復(fù)合物的基本形態(tài)，可知磷脂復(fù)合物包合完整，且較為圓整；薄層鑒別結(jié)果顯示，磷脂與丹酚酸B鍵合完全。而DSC實驗的結(jié)果表明，形成的丹酚酸B磷脂復(fù)合物后，其熱力學(xué)性質(zhì)發(fā)生了根本變化；粒徑測定的實驗結(jié)果表明，丹酚酸B磷脂復(fù)合物的平均粒徑

5、為103.5nm，基本符合復(fù)合物粒徑大小的要求，粒徑分布基本符合正態(tài)分布。以上理化性質(zhì)表明丹酚酸B磷脂復(fù)合物鍵合完全。
　　 (2)通過對丹酚酸B及其磷脂復(fù)合物中丹酚酸B的溶解度和油/水表觀分配系數(shù)的測定可知：磷脂的鍵合使得丹酚酸B在水中的溶解度有所下降，但仍能溶解；而丹酚酸B磷脂復(fù)合物較丹酚酸B在三種介質(zhì)(水溶液、0.1mol/LHC1溶液、pH7.4PBS液)中的油水分配系數(shù)分別提高了8.94，18.05和6.16倍。對丹酚

6、酸B及其磷脂復(fù)合物在三種介質(zhì)中穩(wěn)定性的考察結(jié)果顯示：與丹酚酸B的穩(wěn)定性相比，丹酚酸B磷脂復(fù)合物在酸性、中性和偏堿性環(huán)境下的穩(wěn)定性都有提高，尤其在pH7.4PBS液中的穩(wěn)定性大大提高，24h僅僅降低了1.1％。以上理化性質(zhì)的改變都提示丹酚酸B磷脂化后有利于藥物的口服吸收。
　　 四、丹酚酸B與其磷脂復(fù)合物在SD大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究
　　 (1)建立了準確、可靠、簡便的大鼠血漿中丹酚酸B含量的測定方法。色譜條件為：色譜柱為

7、Venus11XBP-C18柱(250mm×4.6mm)，有預(yù)柱，流動相：甲醇：乙腈：1.67％甲酸(30:10:60)，流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測器波長：280nm，進樣量：10μl。
　　 (2)將大鼠隨機分組分別灌胃丹酚酸B與丹酚酸B磷脂復(fù)合物2 g/kg，HPLC測定不同時間間隔的血藥濃度，運用DAS1.0藥動學(xué)程序計算藥動學(xué)參數(shù)。結(jié)果丹酚酸B磷脂復(fù)合物的相對生物利用度為162.80％。表明丹酚酸B磷脂