家蠶抑前胸腺肽受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究.pdf

1、昆蟲神經(jīng)肽在昆蟲生理活動(dòng)中具有重要作用，參與調(diào)控昆蟲器官活動(dòng)以及昆蟲的生長發(fā)育、蛻皮變態(tài)等生理過程。昆蟲的蛻皮變態(tài)發(fā)育過程受到蛻皮激素的嚴(yán)格調(diào)控，而這些蛻皮激素的合成則由一些神經(jīng)肽進(jìn)行調(diào)控，包括正調(diào)控因子和負(fù)調(diào)控因子，其中家蠶抑前胸腺肽是從家蠶幼蟲腦內(nèi)分離并且純化的一種新型的抑制前胸腺中蛻皮類激素合成的昆蟲神經(jīng)肽。最近有研究發(fā)現(xiàn)家蠶中的黑腹果蠅性肽DmSP的受體被鑒定為是家蠶抑前胸腺肽的受體，但是該受體的下游信號通路至今仍模糊不清。本論

2、文利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞HEK293以及昆蟲細(xì)胞SF21異源表達(dá)系統(tǒng)，對于受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)，合成的黑腹果蠅性肽以及抑前胸腺肽都能夠抑制由Forskolin或者AKH引起的CRE驅(qū)動(dòng)的熒光素酶的活性;但是與抑前胸腺肽相比，黑腹果蠅性肽引起的Ca2+流以及受體的內(nèi)吞作用明顯減弱。除此之外，用FAM熒光集團(tuán)標(biāo)記的DmSP以及BmPTSP3能夠與受體BmPTSPR/SPR發(fā)生特異性的結(jié)合;FAM標(biāo)記的DmSP可以被未標(biāo)記的DmS

3、P競爭性的結(jié)合下來，而不能被未標(biāo)記的BmPTSP3結(jié)合下來;反之亦然，F(xiàn)AM標(biāo)記的BmPTSP3只能被未標(biāo)記的BmPTSP3競爭替換下來，不能被未標(biāo)記的DmSP競爭替換下來。受體內(nèi)吞的數(shù)據(jù)顯示，BmPTSP1可以激活受體招募細(xì)胞內(nèi)昆蟲arrestin蛋白Kurtz，而DmSP并不能招募arrestin蛋白，從而使得受體內(nèi)吞。以上的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)都表明，跟DmSP相比較，BmPTSP1更像是受體BmPTSPR/SPR的內(nèi)源性配體。我們認(rèn)為黑腹果