抑前胸腺分泌蛻皮甾類激素的腦神經(jīng)肽的研究.pdf_第1頁
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1、利用人工合成家蠶Bombyx mori抑前胸腺肽(prothoracicostatic peptide,Bom-PTSP),其一級(jí)結(jié)構(gòu)為AWQDLNASAW-NH<,2>分子量為1089.78Da,用不同載體(BSA或OVA)經(jīng)戊二醛一步法偶聯(lián)得到免疫抗原(BSA-PTSP)和檢測(cè)抗原(OVA-PTSP),常規(guī)免疫BALB/c小鼠.經(jīng)Dot Blot和間接ELISA法檢測(cè),得到對(duì)PTSP有很強(qiáng)免疫應(yīng)答的小鼠,取其脾臟細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞

2、Sp2/0在50％PEG的介導(dǎo)下進(jìn)行細(xì)胞融合.此外,利用CLONTECH的"SMART cDNA Synthesis bv Primer Extension"技術(shù),構(gòu)建了蓖麻蠶幼蟲5齡2天腦的cDNA文庫,并用抗PTSP的多抗血清對(duì)該文庫進(jìn)行了免疫篩選,初步得到了與抗PTSP多抗血清有免疫反應(yīng)的陽性克隆.對(duì)所得到的陽性克隆可以對(duì)其進(jìn)行亞克隆,通過PCR和RACE技術(shù)克隆出蓖麻蠶中類PTSP功能的基因,以便對(duì)其進(jìn)行深一步的研究.對(duì)PTSP

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