小鼠卵子突變基因的修飾基因發(fā)現和定位.pdf

1、自20世紀初，小鼠的遺傳學研究從寵物農場進入哈佛大學的實驗室只有短短一百年的歷史；但是，由于小鼠基因組與人類基因組高度同源、小鼠基因組改造手段非常成熟以及小鼠近交系、突變系和工具小鼠品系種類繁多，小鼠遺傳學已成為發(fā)育生物學、功能基因組學和疾病機理研究的核心研究領域，小鼠也成為最重要的模式生物之一。 近交系小鼠DDK具有一種奇異的、極性不予的繁殖特性，亦稱DDK綜合癥。這種極性不育的特性是由于DDK卵子細胞質物質和其它品系精子因子

2、之間存在的一種不親和性引起的，它們二者均受到位于小鼠第11條染色體的卵子突變(Ovum Mutan或Om)位點上的1對等位基因所控制。近年來，趙衛(wèi)東老師發(fā)現B6遺傳背景中存在著卵子突變基因的修飾基因，這些修飾基因使Om位點雜合型的雌鼠胚胎死亡率隨著其B6背景基因頻率的增加而升高。同時，也有學者采用不同的方法和手段先后發(fā)現和報道了Om修飾基因的存在，但在修飾基因的數目多少和表達方式上，存在著不同的認識。 本研究旨在探明B6小鼠品系

3、中存在的Om修飾基因的數目及其在染色體上的方位，為研究修飾基因的作用方式打下基礎。在趙衛(wèi)東老師前期收集164個樣本的基礎上進一步加大樣本的數量，并在已經存在修飾基因的染色體區(qū)段篩選微衛(wèi)星引物，進行修飾基因的精細定位，為以后的基因克隆以及探明其作用方式和作用機理打下基礎，實驗結果如下： 1.微衛(wèi)星引物的篩選：我們分別在第9和14條染色體上各隨機挑選50和30對引物，共篩選出有多態(tài)性的引物8對，其中第9條染色體上有3對(D9Mitl

4、28、D9Mit140、D9Mit318)，第14條染色體上有5對(D14Mit14、D14Mitl29、D14Mit59、D14Mit35、D14Mit50)。 2.連鎖分析：我們運用winQTLcart軟件對48個樣本進行了復合區(qū)間作圖分析，在第10條染色體上發(fā)現胚胎著床數和存活胎仔數的QTLs，其LOD值分別為0.8和3.2。另外，在第5、6、9和14條染色體上也可能存在OTLs它們的L,0D值均達到1. 5以上,此結果與