小鼠卵子突變基因的修飾基因發(fā)現(xiàn)和定位.pdf

1、自20世紀(jì)初，小鼠的遺傳學(xué)研究從寵物農(nóng)場(chǎng)進(jìn)入哈佛大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室只有短短一百年的歷史；但是，由于小鼠基因組與人類(lèi)基因組高度同源、小鼠基因組改造手段非常成熟以及小鼠近交系、突變系和工具小鼠品系種類(lèi)繁多，小鼠遺傳學(xué)已成為發(fā)育生物學(xué)、功能基因組學(xué)和疾病機(jī)理研究的核心研究領(lǐng)域，小鼠也成為最重要的模式生物之一。 近交系小鼠DDK具有一種奇異的、極性不予的繁殖特性，亦稱(chēng)DDK綜合癥。這種極性不育的特性是由于DDK卵子細(xì)胞質(zhì)物質(zhì)和其它品系精子因子

2、之間存在的一種不親和性引起的，它們二者均受到位于小鼠第11條染色體的卵子突變(Ovum Mutan或Om)位點(diǎn)上的1對(duì)等位基因所控制。近年來(lái)，趙衛(wèi)東老師發(fā)現(xiàn)B6遺傳背景中存在著卵子突變基因的修飾基因，這些修飾基因使Om位點(diǎn)雜合型的雌鼠胚胎死亡率隨著其B6背景基因頻率的增加而升高。同時(shí)，也有學(xué)者采用不同的方法和手段先后發(fā)現(xiàn)和報(bào)道了Om修飾基因的存在，但在修飾基因的數(shù)目多少和表達(dá)方式上，存在著不同的認(rèn)識(shí)。 本研究旨在探明B6小鼠品系

3、中存在的Om修飾基因的數(shù)目及其在染色體上的方位，為研究修飾基因的作用方式打下基礎(chǔ)。在趙衛(wèi)東老師前期收集164個(gè)樣本的基礎(chǔ)上進(jìn)一步加大樣本的數(shù)量，并在已經(jīng)存在修飾基因的染色體區(qū)段篩選微衛(wèi)星引物，進(jìn)行修飾基因的精細(xì)定位，為以后的基因克隆以及探明其作用方式和作用機(jī)理打下基礎(chǔ)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.微衛(wèi)星引物的篩選：我們分別在第9和14條染色體上各隨機(jī)挑選50和30對(duì)引物，共篩選出有多態(tài)性的引物8對(duì)，其中第9條染色體上有3對(duì)(D9Mitl

4、28、D9Mit140、D9Mit318)，第14條染色體上有5對(duì)(D14Mit14、D14Mitl29、D14Mit59、D14Mit35、D14Mit50)。 2.連鎖分析：我們運(yùn)用winQTLcart軟件對(duì)48個(gè)樣本進(jìn)行了復(fù)合區(qū)間作圖分析，在第10條染色體上發(fā)現(xiàn)胚胎著床數(shù)和存活胎仔數(shù)的QTLs，其LOD值分別為0.8和3.2。另外，在第5、6、9和14條染色體上也可能存在OTLs它們的L,0D值均達(dá)到1. 5以上,此結(jié)果與