葛根總黃酮的微波輔助萃取與大孔樹(shù)脂純化.pdf

1、葛根是一種傳統(tǒng)中草藥,是豆科葛屬植物野葛或粉葛的根.葛根的藥理活性成分主要是其含有的異黃酮類(lèi)物質(zhì).目前,從葛根提取物中分離出的異黃酮有20余種,主要活性成分是葛根素、黃豆苷元和黃豆苷.其中,葛根素是葛屬植物的特有成分,含量最高;黃豆苷元有"植物雌激素"之稱(chēng).在植物界中,異黃酮有"生物雌激素"之稱(chēng),而黃豆苷的結(jié)構(gòu)與哺乳動(dòng)物的雌激素最相似.目前,中草藥提取的現(xiàn)代化技術(shù)有超臨界萃取、超聲波提取、半仿生提取法、微波輔助萃取等.本文以水為溶劑,以

2、甘葛根為原料,利用微波輔助萃取葛根異黃酮.首先,進(jìn)行單因素的研究,考察微波作用檔次和葛根取材部位對(duì)葛根總異黃酮提取的影響,結(jié)果是兩者對(duì)葛根總異黃酮的提取的影響顯著,確定微波萃取的初步條件:在微波作用時(shí)間為45s時(shí),選用微波高火檔和有葛根粉末粗纖維的原料中,葛根異黃酮的提取率最高.其次本文以葛根粉末的重量(mg)與水的體積(ml)的比例(稱(chēng)為固液比,W:V)、微波作用時(shí)間以及乙醇與濃縮液的體積比(V:V)三個(gè)因素為編碼因子,以葛根總異黃酮

3、的提取率(Y﹪)為考察對(duì)象,利用通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)葛根總異黃酮的微波輔助萃取和乙醇初步純化試驗(yàn),建立了數(shù)學(xué)模型.本文對(duì)葛根總異黃酮粗提物進(jìn)行大孔樹(shù)脂的吸附層析處理,以乙醇不連續(xù)梯度進(jìn)行洗脫,對(duì)吸附時(shí)間、洗脫劑流速以及層析柱的使用次數(shù)等影響因素進(jìn)行研究,葛根總異黃酮的純度和提取率為考察對(duì)象,結(jié)果是:在吸附時(shí)間分別為0.5、1、3、5、10h時(shí),30﹪乙醇洗脫,吸附0.5h時(shí)的洗脫效果最好,純度為39.02﹪,比樣品液提高了47倍,而收率以3

4、0﹪乙醇洗脫,吸附3h時(shí)最高,為76.84﹪,總異黃酮的純度約14﹪;在洗脫劑流速研究中,洗脫速度為1 ml/min,乙醇濃度為30﹪,葛根總異黃酮的純度最高;大孔樹(shù)脂使用次數(shù)對(duì)葛根總異黃酮的提取影響明顯,新柱的效果為佳,30﹪乙醇洗脫的純度最好.三個(gè)研究因素的影響明顯,確定的大孔樹(shù)脂層析條件為:吸附時(shí)間0.5h,乙醇流速1ml/min,層析柱使用一次后再生.葛根異黃酮提取物在大孔樹(shù)脂純化后,進(jìn)行了反相液相色譜的鑒定.對(duì)兩個(gè)樣品進(jìn)行分析

5、,樣品1是在吸附0.5h,流速1ml/min,新活化的吸附柱,30﹪乙醇洗脫的條件下分離得到,樣品2是流速1ml/min,吸附5h時(shí),95﹪乙醇的洗脫分離所得.結(jié)果是:樣品1中葛根素含量為25.36﹪,樣品2中葛根素含量極低.微波輔助萃取葛根異黃酮的研究有不少報(bào)道,但是都是以野葛根為材料,乙醇為提取介質(zhì),采用正交設(shè)計(jì)、通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計(jì)或均勻設(shè)計(jì)進(jìn)行研究.本文以栽培品種甘葛為原料,以水為溶媒,采用通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計(jì)進(jìn)行微波輔助提取葛根異黃酮研究,對(duì)

6、提取影響因素進(jìn)行了探討,建立了數(shù)學(xué)模型.結(jié)果表明,采用微波提取甘葛的葛根異黃酮是可行的,但是需要進(jìn)一步提高提取率.建立理想的提取模型.研究顯示,AB-8型大孔吸附樹(shù)脂是分離純化葛根異黃酮的一種較理想的樹(shù)脂,本文的研究進(jìn)一步證明這一結(jié)論.然而,以往研究都是以乙醇的單一濃度洗脫,以提取率為考察因素進(jìn)行研究.本文以乙醇的不連續(xù)梯度洗脫,以葛根異黃酮的純度為考察因素進(jìn)行研究.結(jié)果顯示,對(duì)從甘葛中提取的異黃酮,AB-8型大孔吸附樹(shù)脂分離純化效果良