VNS對戊四氮致癇大鼠血清及海馬CA3區(qū)TNF-α,IL-1β的影響和治療研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、[目的]
   采用戊四氮(Pentylenetetrazol,PTZ)致癲癇Sprague-Dawley大鼠模型,探討癲癇發(fā)生發(fā)展過程中SD大鼠血清及海馬CA3區(qū)腦組織中細胞因子TNF-α,IL-1β的含量變化;并用迷走神經(jīng)刺激(Vagus Nerve Stimulation,VNS)干預,觀察其對癲癇大鼠血清和海馬CA3區(qū)腦組織中TNF-α,IL-1β含量的影響,以及血清與海馬CA3區(qū)腦組織中TNF-α,IL-1β表達水平的

2、相關性。以探討VNS在抗癲癇中是否發(fā)揮了免疫調(diào)節(jié)作用,也為探索其發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的可能途徑提供一定的實驗依據(jù)。
   [方法]
   健康成年雄性SD大鼠60只,先隨機分為3組,即單純VNS組(n=8+2)、戊四氮造模組(n=42)和空白對照組(n=8)。對戊四氮造模組按50mg/kg·d進行腹腔注射PTZ溶液,連續(xù)注射30天,建立SD大鼠癲癇點燃模型,在造模過程中大鼠出現(xiàn)死亡或不符合要求者予以剔除,從戊四氮造模組中隨機

3、選擇點燃成功的30只大鼠,再隨機分為3組:PTZ組(n=8+2)、PTZ+VNS組(n=8+2)和假手術組(n=8+2)。VNS刺激參數(shù):電壓3.5V、電流1 mA、頻率20Hz、波寬500μs、刺激30s間歇1min、每天刺激130min。VNS干預4周后麻醉處死全部實驗動物,經(jīng)左心室抽取動脈血4~5ml,凝固,離心,取上清液,-70℃保存?zhèn)溆?。取血結束后迅速斷頭取腦,于冰盒上快速分離出左側海馬,固定包埋以備實驗。ELISA法測定各組

4、大鼠血清。TNF-α,IL-1β的含量,免疫組織化學法檢測各組大鼠海馬CA3區(qū)腦組織中TNF-α,IL-1β的表達和分布,利用計算機圖象對比分析各組大鼠海馬CA3區(qū)腦組織中TNF-α,IL-1β的表達水平。
   [結果]
   1.癲癇大鼠行為學觀察:造模SD大鼠均出現(xiàn)不同程度的癲癇發(fā)作,造模成功。
   2.ELISA法檢測血清TNF-α的含量:PTZ組血清中TNF-α含量較空白對照組明顯升高(P<0.05)

5、,PTZ+VNS組血清中TNF-α含量較PTZ組明顯降低(P<0.05),但是仍高于空白對照組(P<0.05);單純VNS組血清中TNF-α含量略高于空白對照組,兩組之間差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.603>0.05);假手術組血清中TNF-α含量略低于PTZ組,兩組之間差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.999>0.05)。
   3.ELISA法檢測血清IL-1β的含量:PTZ組血清中IL-1β含量較空白對照組明顯升高(P<0.05)

6、,PTZ+VNS組血清中IL-1β含量較PTZ組明顯降低(P<0.05),較空白對照組略高,但兩者之間差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.06>0.05);單純VNS組血清中IL-1β含量略低于空白對照組,兩組之間差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.982>0.05);假手術組血清中IL-1β含量略低于PTZ組,兩組之間差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.955>0.05)。
   4.TNF-α免疫組化染色:取海馬CA3區(qū)進行圖象對比分析;PTZ組、

7、假手術組陽性細胞表達均顯著高于空白對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05):PTZ+VNS組陽性細胞表達較PTZ組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),但是仍高于空白對照組(P<0.05);單純VNS組中陽性細胞表達略低于空白對照組,差異不具有統(tǒng)計學意義(P=1.000>0.05);假手術組陽性細胞表達略低于PTZ組,差異不具有統(tǒng)計學意義(P=0.995>0.05)。
   5.IL-1β免疫組化染色:取海馬CA3區(qū)進行圖象

8、對比分析;PTZ組、假手術組陽性細胞表達均顯著高于空白對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);PTZ+VNS組陽性細胞表達較PTZ組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),但是仍略高于空白對照組(P<0.05);單純VNS組中陽性細胞表達略高于空白對照組,差異不具有統(tǒng)計學意義(P=1.000>0.05);假手術組陽性細胞表達略低于PTZ組,差異不具有統(tǒng)計學意義(P=0.974>0.05)。
   6.血清與海馬CA3區(qū)TNF

9、-α,IL-1β表達的相關性分析:大鼠血清中TNF-α與IL-1β表達水平之間呈顯著正相關(n=40,r=0.923,P<0.01);大鼠海馬CA3區(qū)TNF-α與IL-1β表達水平之間呈顯著正相關(n=120,r=0.909,P<0.01);TNF-α在大鼠血清中與海馬CA3區(qū)的表達水平之間呈顯著正相關(n=40,r=0.913,P<0.01);IL-1β在大鼠血清中與海馬CA3區(qū)的表達水平之間呈顯著正相關(n=40,r=0.907,P

10、<0.01)。
   [結論]
   1.血清及海馬CA3區(qū)腦組織中TNF-α,IL-1β等細胞因子介導的炎癥反應促進了癲癇的發(fā)生發(fā)展。
   2.在與癲癇密切相關的炎癥反應中TNF-α與IL-1β的表達之間存在相互促進活性的關系。
   3.癲癇發(fā)生發(fā)展中可能伴隨著BBB及腦-腦脊液屏障的破壞或通透性改變。
   4.VNS對外周和中樞都有免疫調(diào)節(jié)的作用;VNS可能通過同時減少外周血及中樞致炎細

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論