卵巢癌化療耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文卵巢癌化療耐藥機(jī)制的研究姓名：史宏暉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦科腫瘤指導(dǎo)教師：楊秀玉潘凌亞20041001中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文卵巢癌化療耐藥機(jī)制的研究中文摘要研究背景和目的：卵巢癌是婦科惡性腫瘤中發(fā)病率占第三位，而死亡率居篼1位的惡性疾患。經(jīng)過(guò)多年努力創(chuàng)立了在腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)基礎(chǔ)上輔助化療的治療策略，但是晚期卵巢癌的5年生存率仍然徘徊在15—20％左右，腫瘤細(xì)胞對(duì)于化療藥物產(chǎn)生耐藥性是主要原因之一。腫瘤

2、耐藥涉及多種機(jī)制，目前的研究結(jié)果表明，多種耐藥相關(guān)基因在卵巢癌中的表達(dá)并不能良好地預(yù)測(cè)腫瘤的耐藥性和預(yù)后，結(jié)合有關(guān)逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性的研究在體內(nèi)達(dá)不到理想效果，說(shuō)明還有許多未知的腫瘤耐藥相關(guān)機(jī)制沒有得到認(rèn)識(shí)。線粒體是普遍存在于真核細(xì)胞中的一種重要的細(xì)胞器，是細(xì)胞進(jìn)行氧化磷酸化，產(chǎn)生ATP的主要場(chǎng)所，維持細(xì)胞能量代謝和正常功能活動(dòng)。近年的研究成果表明線粒體／mtDNA在腫瘤發(fā)生、自由基產(chǎn)生和凋亡調(diào)節(jié)方面亦具有重要作用。鑒于線粒體／mtDNA在

3、凋亡過(guò)程中占有重要地位、線粒體能量代謝涉及多個(gè)腫瘤耐藥機(jī)制，推測(cè)腫瘤耐藥可能與線粒體／mtDNA有關(guān)，在核基因組與線粒體基因組的共同作用下，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。目前圍內(nèi)外未見相關(guān)報(bào)道。本研究旨在通過(guò)比較臨床初治與復(fù)發(fā)卵巢癌組織巾mtDNA改變、耐藥基因表達(dá)的差異，分析和評(píng)估細(xì)胞核及細(xì)胞漿的共同作用對(duì)于卵巢癌耐藥性的影響，為從多水平和運(yùn)用多種機(jī)制克服和逆轉(zhuǎn)卵巢癌耐藥打下分子生物學(xué)基礎(chǔ)。研究?jī)?nèi)容：1為研究mtDNA與腫瘤耐藥的關(guān)系，提取初治

4、卵巢癌和復(fù)發(fā)卵巢癌組織及其周圍正常組織中的DNA，PCR擴(kuò)增線粒體基因組，并對(duì)全長(zhǎng)側(cè)序，尋找突變位點(diǎn)和多態(tài)性變化。2為研究核耐藥基因表達(dá)與腫瘤耐藥的關(guān)系，采用PTPCR的方法檢測(cè)目前耐藥領(lǐng)域獲得普遍重視的耐藥基因MDR一1，MRP，LRP和GSTp在初制和復(fù)發(fā)卵巢癌組織中的表達(dá)情況。3以回歸分析的方法探索線粒體基因組變化與上述耐藥基因表達(dá)間的關(guān)系，期待發(fā)現(xiàn)對(duì)腫瘤耐藥產(chǎn)生影響的線粒體基因組區(qū)段。分析和評(píng)估細(xì)胞核及細(xì)胞漿共同作用對(duì)于卵巢癌耐