上皮性卵巢癌組織和化療耐藥相關的基因譜篩查.pdf

1、目的:上皮性卵巢癌的發(fā)病率約占卵巢惡性腫瘤85％-90％[1]，規(guī)范化手術加以鉑類為基礎的化療是其目前的主要治療方法。雖然卵巢癌的5年生存率較化療藥物出現(xiàn)前有所提升，但由于化療耐藥的發(fā)生，至今仍徘徊在20％～30％之間。研究化療耐藥發(fā)生機制、預測患者的耐藥譜進而指導臨床化療用藥是當前醫(yī)學界亟需解決的難題。隨著科學研究的進展，發(fā)現(xiàn)化療耐藥與多種基因表達異常相關，這些基因通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)藥物濃度、細胞的凋亡、DNA的修復等途徑參與卵巢癌化療耐

2、藥。國內(nèi)外學者多對耐藥基因在細胞系中的表達研究較多，無明顯臨床作用。本實驗通過real-time PCR技術檢測上皮性卵巢癌組織中與化療耐藥相關的基因表達進行篩查統(tǒng)計，整體上了解卵巢癌患者化療耐藥基因的表達差異，后續(xù)與患者臨床資料相結合，篩選出具有臨床意義且存在表達差異的基因，有望通過對上皮性卵巢癌患者進行化療前耐藥基因譜的檢測以指導臨床用藥。
　　方法:組織標本取自河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院婦科2013年1月至2014年2月手術切除標

3、本50例，其標本均經(jīng)病理檢查證實。應用real-time PCR技術檢測20例上皮性卵巢癌組織（根據(jù)FIGO分期為高、中分化10例，低分化10例;早期7例，晚期13例。其中卵巢漿液性癌4例，卵巢粘液性癌2例，卵巢透明細胞癌2例，卵巢子宮內(nèi)膜樣癌12例），10例上皮性良性卵巢腫瘤組織標本（卵巢粘液性囊腺瘤5例，卵巢漿液性囊腺瘤2例，卵巢囊腫3例）和20例正常卵巢組織標本中化療耐藥相關基因(MDR1、MRP1、BCRP、LRP、GSTP1、

4、BRCA1、ERCC1、hMLH1、hMSH2、bcl-2、caspase3、survivin、P53、Topo-Ⅱα、FZD-1、Smac、EZH2、XRCC1、Wnt-1、EGFR、PTEN、TUBB3、TRAG3、CRR9、XIAP和NF-κB)mRNA的表達情況。上皮性卵巢癌組為實驗組，上皮性良性卵巢腫瘤組和正常卵巢組為對照組。
　　結果:1MRP1 mRNA表達
　　MRP1 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵

5、巢腫瘤組、正常卵巢組中的相對表達量分別為(101.92±106.60)、(16.66±9.46)、（81.31±86.31）。上皮性卵巢癌組MRP1 mRNA相對表達量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組MRP1 mRNA的相對表達量（P=0.03），與正常卵巢組相比未見明顯差異(P=0.56)。
　　2 BCRP mRNA的表達
　　BCRP mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為(15.39

6、±30.86)、(21.14±12.22)、（83.08±67.10）。上皮性卵巢癌組BCRP mRNA相對表達量顯著低于正常卵巢組BCRPmRNA的相對表達量（P=0.00），與上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異(P=0.58)。
　　3 BRCA1 mRNA的表達
　　BRCA1 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為(9.44±13.08)、(1.40±1.29)、(1.99±3.0

7、7)。上皮性卵巢癌組BRCA1 mRNA相對表達量顯著高于正常卵巢組BRCA1mRNA的相對表達量(P=0.02)，與上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異(P=0.24)。
　　4 Topo-ⅡαmRNA的表達
　　Topo-ⅡαmRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為(89.51±117.22)、(3.88±4.93)、(3.87±7.99)。上皮性卵巢癌組Topo-ⅡαmRNA相對表達量顯

8、著高于上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組Topo-ⅡαmRNA的相對表達量(P=0.01，P=0.01)。
　　5 bcl-2 mRNA的表達
　　bcl-2 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為(34.19±44.20)、(12.45±6.72)、（93.38±94.57）。上皮性卵巢癌組bcl-2 mRNA相對表達量顯著低于正常卵巢組bcl-2mRNA的相對表達量(P=0.02)，與

9、上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異(P=0.38)。
　　6 caspase3 mRNA的表達
　　caspase3 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為(26.08±18.10)、（3.91±2.91）、(13.33±9.38)。上皮性卵巢癌組caspase3 mRNA相對表達量與上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組caspase3 mRNA的相對表達量相比均有顯著差異(P=0.03，P=

10、0.02)。
　　7 survivin mRNA的表達
　　survivin mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為（183.47±143.71）、（107.81±131.24）、（63.04±94.66）。上皮性卵巢癌組survivin mRNA相對表達量顯著高于正常卵巢組survivin mRNA的相對表達量(P=0.01)，與上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異(P=0.36)。

11、>　　8 P53 mRNA的表達
　　P53 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為（135.25±142.04）、（16.10±7.68）、（107.90±106.83）。上皮性卵巢癌組P53 mRNA相對表達量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組P53 mRNA的相對表達量（P=0.01），與正常卵巢組相比未見明顯差異(P=0.55)。
　　9 XIAP mRNA的表達
　　XIAP

12、mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為（21.84±14.79）、（23.32±23.47）、(62.10±48.60)。上皮性卵巢癌組XIAP mRNA相對表達量顯著低于正常卵巢組XIAPmRNA的相對表達量(P=0.03)，與上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異(P=0.34)。
　　10 EGFR mRNA的表達
　　EGFR mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組

13、的相對表達量分別為（3663.26±3069.61）、（3872.03±6031.59）、（13724.40±14556.37）。上皮性卵巢癌組EGFR mRNA相對表達量顯著低于正常卵巢組EGFR mRNA的相對表達量（P=0.01），與上皮性良性腫瘤組相比未見明顯差異（P=0.95）。
　　11 EZH2 mRNA的表達
　　EZH2 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對表達量分別為（146.

14、91±120.40）、（8.34±8.33）、（60.08±32.35）。上皮性卵巢癌組EZH2 mRNA相對表達量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組EZH2 mRNA的相對表達量（P=0.03，P=0.01）。
　　12上皮性卵巢癌組MDR1、LRP、GSTP1、ERCC1、hMLH1、hMSH2、FZD-1、 Smac、 XRCC1、Wnt-1、PTEN、TUBB3、TRAG3、CRR9和NF-κB的mRNA相對表達量與

15、上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組相比均無明顯差異(P＞0.05)。
　　13對MRP1、BCRP、BRCA1、bcl-2、caspase3、survivin、P53、Topo-Ⅱα、EZH2、EGFR和XIAP mRNA在上皮性卵巢癌不同病理分級及分期之間進行比較均未見明顯差異(P＞0.05)。
　　結論:MRP1、BCRP、BRCA1、Topo-Ⅱα、bcl-2、caspase3、survivin、P53、XIAP、EGF