DBTC聯(lián)合乙醇誘發(fā)小鼠CP模型的建立及柴胡疏肝散對(duì)其的影響研究.pdf

1、【目的】
　　 觀察二丁基二氯化錫（Dibutyltin dichloride，DBTC）聯(lián)合乙醇誘發(fā)小鼠胰腺纖維化的作用，以望建立一種可靠的慢性胰腺炎胰腺纖維化模型；觀察柴胡疏肝散對(duì)慢性胰腺炎小鼠胰腺纖維化的干預(yù)作用，及對(duì)相關(guān)指標(biāo)的影響，探討柴胡疏肝散防治慢性胰腺炎胰腺纖維化的作用及機(jī)制。
　　 【方法】
　　 健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為3組（n=40）：空白組（Control，Con組）、慢性胰腺炎(Chron

2、ic Pancreatitis，CP)模型組、柴胡疏肝散（Entrapement scattered ShuGan）治療組。模型組及柴胡疏肝散組經(jīng)尾靜脈一次性注射DBTC（8mg/kg）后以10％乙醇飼喂造模，造模后第三天隨機(jī)分為模型組和柴胡疏肝散組，柴胡疏肝散組以柴胡疏肝散（0.5g生藥/ml，6g/kg/d））進(jìn)行灌胃治療。各組在造模后第1天、第1周、第2周、第4周、第8周五個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別麻醉處死動(dòng)物，取血檢測(cè)血清淀粉酶（AMS）、脂

3、肪酶（Lipase）的活性變化；取胰腺、肺、肝、脾組織，甲醛固定、石蠟包埋、切片，HE染色及膠原纖維（Masson）染色觀察組織病理學(xué)改變。
　　 【結(jié)果】
　　 1.DBTC聯(lián)合乙醇誘發(fā)小鼠慢性胰腺炎胰腺纖維化模型。
　　 小鼠經(jīng)尾靜脈注射DBTC聯(lián)合10％乙醇飼喂后，1天血清淀粉酶活性明顯升高、1周、2周、4周較造模后1天稍有下降，但與空白組相比，血清淀粉酶活性仍明顯升高，差異具有顯著性（P<0.01）,而8

4、周時(shí)血清淀粉酶活性明顯降低（P<0.01）；造模后1天血清脂肪酶活性升高（P<0.05），而1周、2周、4周、8周血清脂肪酶活性均降低，與空白組比較，差異具有顯著性（P<0.01）。造模后1天可見胰腺腺泡細(xì)胞腫脹，間質(zhì)有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)及出血，并可見胰腺腺泡多處不同程度的片狀壞死；造模后1周、2周即可見胰腺明顯腫脹,胰膽管擴(kuò)張，實(shí)質(zhì)變性，間質(zhì)水腫,大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，1周后即可見成纖維細(xì)胞，胰腺實(shí)質(zhì)纖維化,2周更為明顯；4周后小葉間纖維化，

5、胰腺腺泡明顯萎縮，出現(xiàn)典型的不規(guī)則纖維化，脂肪替代，胰島游離，結(jié)構(gòu)松散。8周可見多個(gè)胰腺小葉內(nèi)的腺泡組織及胰島消失，纖維組織廣泛增生呈網(wǎng)格狀。膠原纖維（Masson）染色顯示造模后4周和8周胰腺腺泡明顯萎縮，出現(xiàn)典型的不規(guī)則纖維化，并可見多個(gè)胰腺小葉內(nèi)的腺泡組織及胰島消失，纖維組織廣泛增生呈網(wǎng)格狀。
　　 2.柴胡疏肝散對(duì)DBTC聯(lián)合乙醇誘發(fā)的慢性胰腺炎的治療作用
　　 柴胡疏肝散治療組血清淀粉酶活性在1周、2周、4周可

6、見明顯降低，與模型組比較,差異具有顯著性(P<0.01)，造模后8周柴胡疏肝散組血清淀粉酶活性下降程度明顯低于模型組，差異具有顯著性(P<0.01)；柴胡疏肝散治療組造模后1周、2周、4周、8周，血清脂肪酶活性低于正常組(P<0.01)，而尤以1周和8周顯著(P<0.01)。柴胡疏肝散治療組在各時(shí)間點(diǎn)胰腺的纖維化損傷程度明顯減輕。
　　 【結(jié)論】
　　 1.DBTC一次性尾靜脈注射聯(lián)合飲用乙醇可以較成功地建立小鼠CP模型