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1、目的:本研究應(yīng)用電生理和藥理學(xué)手段研究乙醇對(duì)感覺(jué)刺激誘發(fā)小鼠小腦顆粒細(xì)胞反應(yīng)的影響,探討乙醇對(duì)小腦顆粒細(xì)胞感覺(jué)信息傳遞的影響機(jī)制,揭示急性酒中毒對(duì)小腦皮層感覺(jué)信息傳遞與整合影響的部分機(jī)制。
方法:ICR小鼠(6-8周齡)經(jīng)腹腔注射烏拉坦(1.3g/kg體重.)麻醉后,在小腦CrusII相應(yīng)部位行直徑為1-1.5mm的開(kāi)顱術(shù),除去硬腦膜,腦表面暴露部位持續(xù)灌流人工腦脊液(ACSF);三叉神經(jīng)感覺(jué)刺激選用吹風(fēng)刺激同側(cè)觸須墊(60m
2、s,50-60psi),刺激由電腦控制、與電生理記錄同步;電生理記錄選用GC場(chǎng)電位記錄,記錄電極內(nèi)充裝20-30微升ACSF,電極阻抗為4-6MΩ;通過(guò)膜片鉗放大器及數(shù)據(jù)采集軟件記錄感覺(jué)刺激誘發(fā)GC場(chǎng)電位變化;電生理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用Clampfit10.2軟件,采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,給藥前后均數(shù)的比較采用配對(duì)T檢驗(yàn),P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)果:
?。?)在烏拉坦麻醉下,吹風(fēng)刺激(60ms,50-
3、60psi)小鼠觸須墊,可誘發(fā)小腦CrusII區(qū)顆粒細(xì)胞高保真反應(yīng),表現(xiàn)為刺激開(kāi)始反應(yīng)(stimulus-on response;P1)大于刺激結(jié)束反應(yīng)(stimulus-off response;P2)。
?。?)小腦表面灌流乙醇對(duì)誘發(fā)反應(yīng)的潛伏期沒(méi)有明顯影響,但可逆性地抑制顆粒細(xì)胞的感覺(jué)刺激誘發(fā)反應(yīng),給與濃度為50mM的乙醇10分鐘后P1振幅值減少(9.9±1.9)%,P2幅值減少(13.7±4.7)%。
(3)乙
4、醇對(duì)小腦顆粒細(xì)胞的感覺(jué)刺激誘發(fā)反應(yīng)的抑制作用有濃度依存性,最小抑制濃度為0.5mM,最大抑制濃度300mM,P1振幅值減少最大值為(19.2±5.1)%。
?。?)高濃度乙醇(500mM)不僅降低P1振幅值,而且明顯降低P1振幅中值(half-width)、振幅下面積(area)、P1上升參數(shù)(rise tau)和衰減參數(shù)(decay tau),表明高濃度乙醇嚴(yán)重影響遞質(zhì)傳遞與信息傳導(dǎo)。
?。?)阻斷GABAA受體活性增
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