腰硬聯(lián)合麻醉后硬膜外持續(xù)輸注鹽酸左旋布比卡因?qū)彝眉顾杓凹股窠?jīng)的毒性作用.pdf

1、目的：
　　觀察家兔腰硬聯(lián)合麻醉（Combined Spinal-Epidural Anesthesia CSEA）后使用硬膜外鎮(zhèn)痛泵持續(xù)硬膜外輸注不同濃度鹽酸左旋布比卡因(Levobupivacaine,LEVO)對家兔脊髓神經(jīng)細(xì)胞及脊神經(jīng)細(xì)胞的損傷情況。
　　方法：
　　家兔四十一只，雌雄不拘，體重2.5±0.5kg，選一只作為解剖對照，觀察雙后肢的運(yùn)動情況并做記錄，處死后取脊髓與脊神經(jīng)根標(biāo)本進(jìn)行HE染色，通過光鏡

2、觀察病理組織學(xué)結(jié)果；再選兩只作為陽性對照,基礎(chǔ)麻醉后在L6-7間隙行蛛網(wǎng)膜下腔穿刺后注射0.5％布比卡因0.2ml與10%葡萄糖0.1ml混合液，觀察后肢活動度情況，48h和72h后分別處死，取脊髓與脊神經(jīng)根標(biāo)本做細(xì)胞凋亡檢測光鏡下觀察病理學(xué)結(jié)果；再隨機(jī)選取36只（其余兩只備麻醉意外補(bǔ)用）在L6-7間隙行蛛網(wǎng)膜下腔穿刺后注射0.5%布比卡因0.2ml與10%葡萄糖0.1ml混合液后，在此間隙硬膜外置管，根據(jù)不同濃度左旋布比卡因配泵（泵內(nèi)

3、藥液總量100ml,2ml/h恒速輸注）分為三組，A組生理鹽水(NS)組，B組0.15%LEVO組，C組0.25%LEVO組。這三組再分為48h組及72h組，即A1，A2;B1，B2;C1，C2組，每組6只，共6組；所有試驗(yàn)兔均在獸用監(jiān)護(hù)儀下進(jìn)行命體征與血流動力學(xué)監(jiān)測。六組動物分別于鎮(zhèn)痛泵開啟30min、48h及72h時(shí)，評估雙后肢運(yùn)動功能變化，根據(jù)組別分別于48h、72h兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死家兔，取脊髓與脊神經(jīng)HE染色做病理學(xué)觀察.免疫組化

4、實(shí)驗(yàn)檢測B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（BCL-2）表達(dá)情況并采用TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡情況，計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)（apoptosis index AI）。
　　結(jié)果：
　　結(jié)果顯示各組脊髓神經(jīng)細(xì)胞和脊神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，后肢活動度無明顯差異。0.15%、0.25%LEVO組間鎮(zhèn)痛泵起效時(shí)間、持續(xù)時(shí)間無顯著差異(P>0.05)。三組間AI和BCL-2蛋白表達(dá)水平在6小組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與對照兔相比也無差異。