綿羊癢病小鼠模型的病理組織學(xué)動(dòng)態(tài)觀察.pdf

1、傳染性海綿狀腦病是人和動(dòng)物的一類慢性、致死性、神經(jīng)性疾病，是牛海綿狀腦病、綿羊癢病以及人的克雅氏病、庫魯病等疾病的統(tǒng)稱。綿羊癢病是最早發(fā)現(xiàn)的TSE，目前認(rèn)為綿羊癢病引起了瘋牛病，并伴隨瘋牛病，引起了人類的變異性克雅氏病。因此，綿羊癢病發(fā)病機(jī)制及其在體內(nèi)增值的研究具有重要的意義。
　　 人工腦內(nèi)感染小鼠癢病RML、22L毒株，通過小鼠組織切片制備，經(jīng)蛋白酶K消化、水化高壓、單抗孵育和ABC試劑盒顯色等步驟分析，建立了一套完整的綿羊

2、癢病小鼠模型病理學(xué)檢測方法。
　　 人工腦內(nèi)感染小鼠癢病RML、22L毒株，分別在感染后90d、110d、120d、150d、160d取腦、脾組織，用酶標(biāo)法進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測。結(jié)果:人工腦內(nèi)感染RML毒株感染后90d、110d、120d、150d、160d小鼠脾臟，均存在朊毒體(PrPSc);感染后90d、110d、120d、150d、160d腦組織均未檢測到PrPSc。人工腦內(nèi)感染22L毒株感染后的90d、110d、120d

3、、150d、160d小鼠脾臟均存在PrPSc，感染后90d、110d、120d、150d、160d腦組織均存在PrPSc。隨著感染后天數(shù)的增加，朊毒體逐漸增多，且朊毒體呈逐漸增大趨勢。說明RML、22L毒株的毒力、侵害部位、體內(nèi)蓄積時(shí)間有著明顯的不同。
　　 人工腦內(nèi)感染小鼠癢病RML、22L毒株，待其發(fā)病后，取腦、脊髓、脾、腸系膜淋巴結(jié)、小腸、大腸、心、肝、肺、腎、肌肉、膀胱等組織按常規(guī)方法制備組織切片，脫蠟后進(jìn)行HE和免疫組

4、織化學(xué)(IHC)染色并觀察。結(jié)果:在感染RML、22L毒株發(fā)病小鼠腦、脊髓有空泡變化且空泡呈規(guī)則的圓形或橢圓形，周邊整齊。心、肝、脾、肺、腎、肌肉、胃、膀胱等組織器官未見明顯病理變化。感染RML毒株發(fā)病小鼠腦、脾、腸系膜淋巴結(jié)、小腸有陽性紅色染色顆粒說明有PrPSc存在，脊髓、心、肝、肺、腎、回腸末端、膀胱、肌肉等組織器官未有PrPSc存在。感染22L毒株發(fā)病小鼠腦、脊髓、大腸、脾、腸系膜淋巴結(jié)見有陽性紅色染色顆粒說明有PrPSc存在，