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文檔簡介
1、[目的]通過結(jié)扎SD大鼠下頜下腺主導(dǎo)管,建立組織損傷模型;觀察導(dǎo)管結(jié)扎后損傷及導(dǎo)管再通后腺體的組織學(xué)變化。 [方法]選用10周齡Sprague-Dawlye(SD)雄性大鼠30只。導(dǎo)管結(jié)扎組20只,導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組10只。導(dǎo)管結(jié)扎組:大鼠麻醉后隨機(jī)行一側(cè)下頜下腺主導(dǎo)管魚線捆綁結(jié)扎,于結(jié)扎后第3天、6天…27天、30天處死動物,取出結(jié)扎及對側(cè)正常對照的下頜下腺。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組:主導(dǎo)管結(jié)扎6天,然后松開結(jié)扎使主導(dǎo)管再通,分
2、別于松開再通后第4天、5天、6天、12天、24天處死動物,取出實驗側(cè)及對照側(cè)下頜下腺組織。以上腺體于10%福爾馬林(pH7.2~7.4)溶液中固定,常規(guī)HE染色,AB-PAS糖原染色和Cytokeratin19,α-SMA, Laminin,AQP-5的免疫組織化學(xué)染色。 [結(jié)果]1.形態(tài)學(xué)觀察,導(dǎo)管結(jié)扎組:與對側(cè)正常腺體相比,腺體體積逐漸減小;由卵圓形變成長梭形,色澤由紅潤轉(zhuǎn)變成暗紅,包膜表面血管增多呈充血狀,質(zhì)地變韌,周圍組
3、織血管代償性擴(kuò)張。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組:所有腺體基本維持在結(jié)扎6天后的大小,腺體稍紅潤,周圍血管充血在導(dǎo)管再通后逐漸消退。2.組織學(xué)觀察,HE、AB-PAS及免疫組織化學(xué)染色:正常腺體:可見大量成熟腺泡,偶可見顆粒導(dǎo)管。導(dǎo)管結(jié)扎組:腺泡逐步萎縮、消失,然后形成導(dǎo)管結(jié)構(gòu),均表達(dá)CK19;在導(dǎo)管基底膜區(qū),有一層表達(dá)LN和α-SMA陽性的細(xì)胞存在,但不表達(dá)CK19,在第12天時最明顯,從第15天后開始減少。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組:導(dǎo)管再通后,導(dǎo)
4、管細(xì)胞向腺泡細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化;在松開后第5天,AQP5表達(dá)增強(qiáng),有成熟的腺泡出現(xiàn),到第24天,有大量成熟腺泡形成;部分導(dǎo)管細(xì)胞向成熟腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)化,同時在導(dǎo)管基底膜區(qū)LN和α-SMA陽性表達(dá)的細(xì)胞逐漸減少。 [結(jié)論]1.主導(dǎo)管結(jié)扎后,腺體體積減小,腺泡細(xì)胞逐步消失,腺體失去分泌功能。結(jié)扎的導(dǎo)管再通后,導(dǎo)管細(xì)胞可向成熟的腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)化。2.由以上觀察,我們初步得到以下結(jié)論:在一定時間內(nèi),導(dǎo)管結(jié)扎腺體的損傷可能會激發(fā)成體干細(xì)胞增殖;導(dǎo)管松開
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