帕歌斯對(duì)EAE大鼠的干預(yù)作用及TNF-α、NFP表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　觀察藥物帕歌斯（Pagosid,PGS）對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）大鼠脊髓中神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament protein,NFP）和腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）表達(dá)的影響，研究其對(duì)多發(fā)性硬化的（multiple sclerosis,MS）是否具有保護(hù)效用及其作用機(jī)制，

2、尋找治療MS的更佳手段。
　　方法：
　　60只Wistar雌性大鼠隨機(jī)分為4組：正常組（N組）、EAE模型組（EAE組）、小劑量PGS組(EAE+PGS20mg/kg.d,PGS1組)、大劑量PGS組(EAE+PGS100mg/kg.d, PGS2組)。使用豚鼠脊髓勻漿( Guinea pig spinal cord homogenate，GPSCH)制備EAE模型。N組不予任何處理；EAE組、PGS1組和PGS2組大鼠在

3、抗原免疫后根據(jù)處死時(shí)間不同，各自在組內(nèi)又分為第7天、第14天、第21天處死的三個(gè)亞組，EAE組不予給藥，PGS1組和PGS2組從免疫后當(dāng)天起，分別每天給予相應(yīng)劑量的帕歌斯灌胃一次至處死。觀察每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)病情況并給予神經(jīng)系統(tǒng)功能評(píng)分。處死后取大鼠脊髓組織切片HE染色后在光鏡下進(jìn)行炎性病灶計(jì)數(shù)。免疫組化方法檢測(cè)各組大鼠脊髓組織中NFP和TNF-α的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．各組實(shí)驗(yàn)鼠發(fā)病率：N組無(wú)大鼠發(fā)??；EAE組發(fā)病率為8

4、8.89％；PGS1組和PGS2組動(dòng)物發(fā)病率明顯低于EAE組(P<0.05)；PGS2組發(fā)病率則低于PGS1組（P<0.05）。
　　2．神經(jīng)功能分值比較：免疫后第7天、第14天、第21天分別給予評(píng)分，在第14天、第21天PGS1、PGS2組評(píng)分均小于EAE組，第14天PGS2組神經(jīng)功能評(píng)分小于PGS1組，差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而從三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行比較，7天組、21天組與14天組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；7天與21

5、天組比較差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3．脊髓病理改變：N組大鼠脊髓中未發(fā)現(xiàn)炎性細(xì)胞；其余3組大鼠脊髓內(nèi)均存在炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。第14天、第21天，PGS1組和PGS2組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)少于同期的EAE組(P<0.05)；PGS2組少于同期PGS1組（P<0.05）；而7天時(shí)間點(diǎn)PGS1組與EAE組并無(wú)明顯差別（P>0.05）；各組內(nèi)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較，第7天、第21天與第14天相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；第7天與第2

6、1天比較，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　4．脊髓NFP和TNF-α的表達(dá)：4組均有NFP的表達(dá)，N組脊髓NFP高表達(dá)但無(wú)TNF-α陽(yáng)性表達(dá)；EAE組、PGS1組、PGS2組均存在TNF-α的陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較：PGS1組、PGS2組NFP高于同期EAE組，TNF-α表達(dá)低于同期EAE組(P<0.05)；第14天PGS2組中TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目低于PGS1組，NFP陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)高于 PGS1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P