帕歌斯對EAE大鼠的干預作用及TNF-α、NFP表達的影響.pdf

1、目的：
　　觀察藥物帕歌斯（Pagosid,PGS）對實驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）大鼠脊髓中神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament protein,NFP）和腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）表達的影響，研究其對多發(fā)性硬化的（multiple sclerosis,MS）是否具有保護效用及其作用機制，

2、尋找治療MS的更佳手段。
　　方法：
　　60只Wistar雌性大鼠隨機分為4組：正常組（N組）、EAE模型組（EAE組）、小劑量PGS組(EAE+PGS20mg/kg.d,PGS1組)、大劑量PGS組(EAE+PGS100mg/kg.d, PGS2組)。使用豚鼠脊髓勻漿( Guinea pig spinal cord homogenate，GPSCH)制備EAE模型。N組不予任何處理；EAE組、PGS1組和PGS2組大鼠在

3、抗原免疫后根據(jù)處死時間不同，各自在組內又分為第7天、第14天、第21天處死的三個亞組，EAE組不予給藥，PGS1組和PGS2組從免疫后當天起，分別每天給予相應劑量的帕歌斯灌胃一次至處死。觀察每只實驗動物發(fā)病情況并給予神經(jīng)系統(tǒng)功能評分。處死后取大鼠脊髓組織切片HE染色后在光鏡下進行炎性病灶計數(shù)。免疫組化方法檢測各組大鼠脊髓組織中NFP和TNF-α的表達。
　　結果：
　　1．各組實驗鼠發(fā)病率：N組無大鼠發(fā)病；EAE組發(fā)病率為8

4、8.89％；PGS1組和PGS2組動物發(fā)病率明顯低于EAE組(P<0.05)；PGS2組發(fā)病率則低于PGS1組（P<0.05）。
　　2．神經(jīng)功能分值比較：免疫后第7天、第14天、第21天分別給予評分，在第14天、第21天PGS1、PGS2組評分均小于EAE組，第14天PGS2組神經(jīng)功能評分小于PGS1組，差異均具統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而從三個時間點進行比較，7天組、21天組與14天組有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；7天與21

5、天組比較差異不具統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　3．脊髓病理改變：N組大鼠脊髓中未發(fā)現(xiàn)炎性細胞；其余3組大鼠脊髓內均存在炎性細胞的浸潤。第14天、第21天，PGS1組和PGS2組炎癥細胞浸潤數(shù)少于同期的EAE組(P<0.05)；PGS2組少于同期PGS1組（P<0.05）；而7天時間點PGS1組與EAE組并無明顯差別（P>0.05）；各組內三個時間點比較，第7天、第21天與第14天相比較有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；第7天與第2

6、1天比較，不具備統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　4．脊髓NFP和TNF-α的表達：4組均有NFP的表達，N組脊髓NFP高表達但無TNF-α陽性表達；EAE組、PGS1組、PGS2組均存在TNF-α的陽性表達。陽性細胞數(shù)比較：PGS1組、PGS2組NFP高于同期EAE組，TNF-α表達低于同期EAE組(P<0.05)；第14天PGS2組中TNF-α陽性細胞數(shù)目低于PGS1組，NFP陽性神經(jīng)元數(shù)高于 PGS1組，差異有統(tǒng)計學意義（P