MMR與以伊立替康為基礎(chǔ)化療的轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的療效及預(yù)后的相關(guān)性.pdf

1、目的:錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair，MMR)基因與結(jié)腸癌的發(fā)生關(guān)系密切，是結(jié)腸癌化療的潛在預(yù)測(cè)因子。本研究旨在探討結(jié)腸癌MMR狀態(tài)與伊立替康（CPT-11）敏感性之間的關(guān)系，明確MMR對(duì)一線接受CPT-11為化療基礎(chǔ)的轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的療效預(yù)測(cè)及預(yù)后作用。
　　方法:入組184例轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌患者，他們均接受以CPT-11為化療基礎(chǔ)的一線治療。隨訪3年無(wú)進(jìn)展生存期(PFS)和總生存期(OS)。免疫組化法確定MMR狀態(tài)，分析它

2、與患者的臨床病理特征之間的關(guān)系;Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型篩選和評(píng)估對(duì)預(yù)后的獨(dú)立影響因素;生存曲線采用Kaplan-Meier法和log-rank檢驗(yàn)。
　　培養(yǎng)結(jié)腸癌細(xì)胞系HCT-116和SW480，通過(guò)hMLH1基因過(guò)表達(dá)和沉默構(gòu)建兩組MMR基因正常表達(dá)(pMMR)和MMR基因表達(dá)缺失(dMMR)相對(duì)照的細(xì)胞。檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)胸苷酸合成酶(TS)的表達(dá)水平。MTT法檢測(cè)CPT-11對(duì)各組細(xì)胞的抑制率，采用ANOVA和SNK檢驗(yàn)法評(píng)估

3、IC50的變化。并在不同濃度CPT-11作用后繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，使用定量蛋白印跡(western blotting)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)TS表達(dá)水平變化。所有檢驗(yàn)方法均為雙側(cè)分布，并且認(rèn)為當(dāng)p＜0.05時(shí)才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:MMR蛋白表達(dá)缺失率約為18.5％，在近端結(jié)腸（P=0.005）或低分化組織(P=0.018)中常見(jiàn)。
　　pMMR患者的疾病控制率(DCR)為66.2％，dMMR為84.8

4、％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.037)。dMMR患者的平均PFS為8.6個(gè)月(95％CI7.1-10.0個(gè)月)，pMMR為6.6個(gè)月(95％CI6.0-7.3個(gè)月)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.018)。dMMR和pMMR的平均OS分別為17.5個(gè)月(95％CI16.7-18.3個(gè)月)和18.7個(gè)月(95％CI17.0-20.4個(gè)月)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.246)。
　　dMMR結(jié)腸癌細(xì)胞（SW480-shRNA-hMLH1、

5、HCT-116hMLH1Vector）對(duì)CPT-11更敏感。CPT-11作用后，細(xì)胞內(nèi)TS的表達(dá)水平均較未經(jīng)CPT-11處理組有所下降，并且在dMMR細(xì)胞中下降更顯著，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:MMR在結(jié)腸癌組織中表達(dá)缺失，dMMR好發(fā)于近端結(jié)腸，低分化組織中，與TS表達(dá)水平無(wú)相關(guān)性。dMMR是轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌患者一線接受CPT-11為基礎(chǔ)化療的良好的療效預(yù)測(cè)因子。dMMR結(jié)腸癌細(xì)胞系對(duì)CPT-11更敏感。CPT