成人斯蒂爾病發(fā)病機(jī)制及其相關(guān)臨床研究.pdf

1、背景：成人斯蒂爾病(Adult-onset still’s disease,AOSD)是一種病因及發(fā)病機(jī)制不明的發(fā)病率較低的自身免疫性炎癥性疾病。我們在前期的工作中發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞游走抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)在AOSD中表達(dá)顯著升高，其相關(guān)遺傳學(xué)研宄也揭示其與AOSD發(fā)病的相關(guān)性。隨著近幾年對以IL-1 P和IL-18產(chǎn)生為主的炎癥小體在風(fēng)濕性疾病中的廣泛而深入研宄，我

2、們不禁聯(lián)想到以IL-1p生物制劑作為特異有效治療方法的AOSD可能與炎癥小體間存在特殊作用。盡管AOSD發(fā)病率較低，以影響16?35歲的青年人為主，但近幾年屢有高齡AOSD患者的報道，那么，老年人作為所有疾病狀態(tài)中較為特殊的一個群體在AOSD發(fā)生發(fā)展中可能具有自己的特點。
　　目的：
　　1.從細(xì)胞學(xué)角度研宄MIF與AOSD發(fā)病的關(guān)系，探索AOSD中MIF可能的致病通路。
　　2.對炎癥小體在AOSD發(fā)病中的作用進(jìn)行相

3、關(guān)遺傳學(xué)研宄，以為臨床提供相關(guān)發(fā)病機(jī)制依據(jù)及建立快速特異的診斷方法。
　　3.對晚發(fā)AOSD患者進(jìn)行相關(guān)臨床方面研宄以探討晚發(fā)AOSD患者的臨床特點，為臨床提供相關(guān)理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.利用密度梯度離心法分離AOSD患者及正常對照組單個核細(xì)胞(PBMC)，通過培養(yǎng)并加入相應(yīng)刺激劑的方法確定最佳時間點及濃度，利用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測細(xì)胞上清IL-17、MIF及IL-1p水平，實時定量PCR(real

4、 time-PCR)法檢測相關(guān)因子細(xì)胞表達(dá)量，同時分別利用RNAimax將siRNA轉(zhuǎn)入PBMC及加入MIF抑制劑4-IPP法對MIF進(jìn)行沉默從而進(jìn)行MIF致病通路研宄相關(guān)實驗。
　　2.從49名AOSD患者及94名正常人中提取基因組DNA，并利用PCR法擴(kuò)增目的片段，送至公司進(jìn)行檢測后與已解碼的人源炎癥小體(NLRP3)基因進(jìn)行比對，以探明AOSD患者體內(nèi)可能存在的發(fā)病相關(guān)基因突變位點。
　　3.收集2004年至2013年

5、于我院住院治療的AOSD患者共328例并對其進(jìn)行電話隨訪以獲得相關(guān)臨床數(shù)據(jù)資料。
　　結(jié)果：
　　1.在AOSD患者M(jìn)IF相關(guān)細(xì)胞學(xué)研宄中我們并未成功證明AOSD患者體內(nèi)MIF致IL-17高表達(dá)的相關(guān)通路。
　　2.在炎癥小體相關(guān)研宄中我們沒有發(fā)現(xiàn)NLRP3 Q705K位點突變，其他突變位點也證實與亞洲人群表達(dá)一致不具有臨床意義。
　　3.在晚發(fā)AOSD患者的相關(guān)臨床特點研宄中我們發(fā)現(xiàn)：晚發(fā)組患者較早發(fā)組在關(guān)節(jié)痛

6、/炎(68.8％與80.9%);肝腫大(2.6%與12%)及脾腫大(13%與35.3%)癥狀中發(fā)生率顯著降低，而在胸膜炎(36.3%與15.5%)及間質(zhì)性肺炎(24.7%與12.7%)癥狀中其發(fā)生率顯著升高，均存在顯著差異(P<0.05);治療方面，晚發(fā)組較少使用MTX，出院時晚發(fā)AOSD患者較少聯(lián)合DMARDS進(jìn)行治療而更多單用激素治療。但通過對患者遠(yuǎn)期隨訪發(fā)現(xiàn)：晚發(fā)組與早發(fā)組患者在病程、預(yù)后及治療方面差異較小。晚發(fā)組及早發(fā)組患者血清