配位作用及樣品前處理-場放大進(jìn)樣在毛細(xì)管電泳在線富集中的應(yīng)用研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)是一種基于電泳和色譜原理的分析技術(shù)。雖然該技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域工作中頗受歡迎,但是檢測靈敏度低仍然成為影響其在痕量樣品分析中的一個重要制約因素,目前已經(jīng)報道了多種方法用來改善CE的檢測限。掃集技術(shù)是CE在線富集技術(shù)中常用的一種方法,該方法在與質(zhì)譜等檢測器聯(lián)用方面存在很大的缺陷,限制了CE在線富集的廣泛推廣。同時,對脂溶性藥物的CE在線富集方面研究也相對較少。因此本文在原

2、有富集方法的基礎(chǔ)上,對富集體系做出進(jìn)一步研究,并提出了新型的配位毛細(xì)管電泳-掃集(CICE-sweeping)在線富集技術(shù)以及樣品前處理-FASS在線富集聯(lián)用技術(shù),這兩種方法對擴(kuò)大CE適用范圍具有重要的意義。
　　本論文的的具體工作內(nèi)容如下:
　　1.以氟喹諾酮類抗生素帕珠沙星、依諾沙星和環(huán)丙沙星為分析對象,建立了新型CICE-sweeping在線富集技術(shù)。在原有的CICE-sweeping在線富集體系的基礎(chǔ)上,引入了EDT

3、A區(qū)段和堿性高導(dǎo)區(qū)段,利用EDTA與金屬藥物配合物之間的配位置換作用,在毛細(xì)管內(nèi)構(gòu)建移動絡(luò)合邊界(moving chelation boundary,MCB)。通過對實驗條件進(jìn)行優(yōu)化和富集體系驗證,結(jié)果表明建立的新型CE在線富集技術(shù)具有良好的富集效果,較傳統(tǒng)的CICE-sweeping法富集倍數(shù)可提高5-6倍,三種藥物的檢測限在0.08-0.20μg/mL之間。實驗最終將該方法應(yīng)用到對兔血清中添加的痕量氟喹諾酮類抗生素進(jìn)行定量檢測,得到

4、的回收率在89-94％之間。
　　2.在上述建立的新型CICE-sweeping在線富集技術(shù)的基礎(chǔ)上,對四環(huán)素類抗生素土霉素、金霉素以及多西環(huán)素進(jìn)行了在線富集和檢測。對體系的分離和富集條件進(jìn)行了優(yōu)化,最終計算得到的三種藥物的富集倍數(shù)在146-295之間。這種方法被應(yīng)用于人血清中痕量土霉素和多西環(huán)素的測定中。
　　3.本節(jié)實驗以脂溶性維生素A、D3、K1為分析對象,對樣品前處理-FASS在線富集技術(shù)進(jìn)行了改進(jìn)。實驗采用十六烷基

5、三甲基溴化銨(CTAB)和十二烷基聚乙二醇醚(Brij-35)混合膠束為樣品基質(zhì),在電泳前預(yù)先將樣品溶解在膠束溶液基質(zhì)中,進(jìn)樣前首先在毛細(xì)管中引入高導(dǎo)硼砂緩沖液和水塞,通過電遷移進(jìn)樣使樣品隨正電荷膠束大量遷移至毛細(xì)管中,隨后以CTAB溶液為運行電解質(zhì)的MEKC模式對樣品進(jìn)行分離和檢測。在優(yōu)化的實驗條件下,得到的樣品峰峰形良好,富集倍數(shù)在167-435之間。該方法簡便、靈敏、可靠,極大地簡化了樣品的前處理過程,提高了分析的效率和檢測的靈敏