配位作用及樣品前處理-場放大進(jìn)樣在毛細(xì)管電泳在線富集中的應(yīng)用研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)是一種基于電泳和色譜原理的分析技術(shù)。雖然該技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域工作中頗受歡迎,但是檢測靈敏度低仍然成為影響其在痕量樣品分析中的一個(gè)重要制約因素,目前已經(jīng)報(bào)道了多種方法用來改善CE的檢測限。掃集技術(shù)是CE在線富集技術(shù)中常用的一種方法,該方法在與質(zhì)譜等檢測器聯(lián)用方面存在很大的缺陷,限制了CE在線富集的廣泛推廣。同時(shí),對(duì)脂溶性藥物的CE在線富集方面研究也相對(duì)較少。因此本文在原

2、有富集方法的基礎(chǔ)上,對(duì)富集體系做出進(jìn)一步研究,并提出了新型的配位毛細(xì)管電泳-掃集(CICE-sweeping)在線富集技術(shù)以及樣品前處理-FASS在線富集聯(lián)用技術(shù),這兩種方法對(duì)擴(kuò)大CE適用范圍具有重要的意義。
　　本論文的的具體工作內(nèi)容如下:
　　1.以氟喹諾酮類抗生素帕珠沙星、依諾沙星和環(huán)丙沙星為分析對(duì)象,建立了新型CICE-sweeping在線富集技術(shù)。在原有的CICE-sweeping在線富集體系的基礎(chǔ)上,引入了EDT

3、A區(qū)段和堿性高導(dǎo)區(qū)段,利用EDTA與金屬藥物配合物之間的配位置換作用,在毛細(xì)管內(nèi)構(gòu)建移動(dòng)絡(luò)合邊界(moving chelation boundary,MCB)。通過對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化和富集體系驗(yàn)證,結(jié)果表明建立的新型CE在線富集技術(shù)具有良好的富集效果,較傳統(tǒng)的CICE-sweeping法富集倍數(shù)可提高5-6倍,三種藥物的檢測限在0.08-0.20μg/mL之間。實(shí)驗(yàn)最終將該方法應(yīng)用到對(duì)兔血清中添加的痕量氟喹諾酮類抗生素進(jìn)行定量檢測,得到

4、的回收率在89-94％之間。
　　2.在上述建立的新型CICE-sweeping在線富集技術(shù)的基礎(chǔ)上,對(duì)四環(huán)素類抗生素土霉素、金霉素以及多西環(huán)素進(jìn)行了在線富集和檢測。對(duì)體系的分離和富集條件進(jìn)行了優(yōu)化,最終計(jì)算得到的三種藥物的富集倍數(shù)在146-295之間。這種方法被應(yīng)用于人血清中痕量土霉素和多西環(huán)素的測定中。
　　3.本節(jié)實(shí)驗(yàn)以脂溶性維生素A、D3、K1為分析對(duì)象,對(duì)樣品前處理-FASS在線富集技術(shù)進(jìn)行了改進(jìn)。實(shí)驗(yàn)采用十六烷基

5、三甲基溴化銨(CTAB)和十二烷基聚乙二醇醚(Brij-35)混合膠束為樣品基質(zhì),在電泳前預(yù)先將樣品溶解在膠束溶液基質(zhì)中,進(jìn)樣前首先在毛細(xì)管中引入高導(dǎo)硼砂緩沖液和水塞,通過電遷移進(jìn)樣使樣品隨正電荷膠束大量遷移至毛細(xì)管中,隨后以CTAB溶液為運(yùn)行電解質(zhì)的MEKC模式對(duì)樣品進(jìn)行分離和檢測。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,得到的樣品峰峰形良好,富集倍數(shù)在167-435之間。該方法簡便、靈敏、可靠,極大地簡化了樣品的前處理過程,提高了分析的效率和檢測的靈敏