富集方法在毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測(cè)中的應(yīng)用研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳是近年來發(fā)展最快的高效分離技術(shù)之一。本論文旨在將樣品在線富集方法應(yīng)用于毛細(xì)管電泳檢測(cè)中，以提高其檢測(cè)靈敏度。 本文前言中，首先簡(jiǎn)單介紹了毛細(xì)管電泳的基本原理及其進(jìn)展情況，然后分析了導(dǎo)致毛細(xì)管電泳檢測(cè)靈敏度差的主要原因并討論了相應(yīng)解決方法。詳細(xì)介紹了場(chǎng)放大樣品堆積、等速電泳和瞬間等速電泳、乙腈降電導(dǎo)法等在線樣品富集方法的分離原理、影響富集因素及應(yīng)用進(jìn)展。最后介紹了多維電泳分離技術(shù)，其分辨率和峰容量均明顯高于一維電泳。

2、 在實(shí)驗(yàn)部分，集成毛細(xì)管區(qū)帶電泳和環(huán)糊精修飾的膠束毛細(xì)管電泳，發(fā)展了一種可同時(shí)提高電泳分辨率和檢測(cè)靈敏度的樣品富集及分離方法。采用陽離子選擇性耗盡進(jìn)樣—瞬間等速電泳雙重富集的毛細(xì)管區(qū)帶電泳法作為第一維，從中流出的組分在環(huán)糊精修飾的膠束毛細(xì)管電泳構(gòu)建的第二維得到進(jìn)一步分離。相對(duì)傳統(tǒng)電動(dòng)進(jìn)樣方法，該方法的檢測(cè)靈敏度提升了14000～35000倍；檢測(cè)范圍在0.03μg/L～0.1μg/L之間；理論塔板數(shù)在103000～184000之間。

3、該方法已成功應(yīng)用于醫(yī)院廢水中痕量心血管藥物的分析，結(jié)果令人滿意。 聯(lián)合在柱電化學(xué)檢測(cè)方法和由一根中間帶微孔的毛細(xì)管構(gòu)建的二維毛細(xì)管電泳，提出一種測(cè)定大鼠血樣中β—受體阻滯劑的新方法。血樣先在第一維經(jīng)毛細(xì)管區(qū)帶電泳純化，然后目標(biāo)區(qū)帶在流體力學(xué)作用下轉(zhuǎn)移至第二維，最后純化的樣品經(jīng)膠束毛細(xì)管電泳分離，并由電化學(xué)檢測(cè)器在柱檢測(cè)。在最優(yōu)檢測(cè)條件下，峰高、峰面積和遷移時(shí)間10次平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.1～4.3％、1.5～3.9％、

4、0.7～1.8％。本方法已成功應(yīng)用于大鼠血樣中β—受體阻滯劑的檢測(cè)，這是使用基于一根帶有微孔的毛細(xì)管的2D—CE和在柱電化學(xué)檢測(cè)對(duì)血樣進(jìn)行管內(nèi)純化和分離以及藥物動(dòng)力學(xué)的研究的首次報(bào)道。 采用2-氨基-3—羥基吡啶—辣根過氧化物酶—H2O2毛細(xì)管電泳電化學(xué)新體系，聯(lián)合一根中間帶微孔的毛細(xì)管構(gòu)建了用于甲胎蛋白分析的毛細(xì)管電泳電化學(xué)酶聯(lián)免疫分析平臺(tái)。實(shí)驗(yàn)采用非競(jìng)爭(zhēng)性免疫模式，在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)定甲胎蛋白的線性范圍為0.5～90ng/