白花蛇舌草對(duì)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及VEGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的
　　通過(guò)研究高糖環(huán)境下白花蛇草注射液（Hedyotis diffusa injection，HDI）對(duì)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(Retinal capillary endothelial cell,HRCECs)的增殖作用及其對(duì)VEGF表達(dá)影響，來(lái)探討白花蛇舌草（Hedyotis diffusa wild，HDW）抑制新生血管形成（neovascularization，NV）的作用機(jī)制，為臨床醫(yī)治糖尿病視網(wǎng)膜病變（Diabeti

2、c retinopathy，DR)提供新途徑。
　　方法
　　體外培養(yǎng)HRCECs，并用Ⅷ-Ab進(jìn)行細(xì)胞免疫化學(xué)鑒定；CCK-8法檢測(cè)高糖下不同濃度藥物HDI作用HRCECs的增殖；用免疫細(xì)胞化學(xué)（Immunocytochemi-stry，ICC）法和酶聯(lián)免疫吸附法(Enzy-melinked immunosorbent assay,ELISA法)檢測(cè)不同濃度藥物HDI作用HRCECs后VEGF表達(dá)的變化。
　　結(jié)果<

3、br>　　1、ICC檢測(cè)體外培養(yǎng)的HRCECsⅧ因子相關(guān)抗原抗體染色陽(yáng)性。2、CCK-8法結(jié)果顯示，用6.25ml/L、12.5ml/L、25ml/L、50ml/L的HDI處理HRCECs培養(yǎng)24h、48h和72h，隨HDI濃度增加和時(shí)間延長(zhǎng)，HDI對(duì)HRCECs的抑制作用越強(qiáng)。作用24h細(xì)胞增殖抑制率分別為3.58±1.06％、8.92±3.32%、15.68±3.18%、33.17±2.49%；作用48h細(xì)胞增殖抑制率分別為4.17

4、±1.53%、14.09±2.98%、31.40±3.71%、45.95±2.63%；作用72h細(xì)胞增殖抑制率分別為4.53±1.09%、24.18±6.53%、47.62±2.96%、63.14±3.37%；HDI作用組與高糖對(duì)照組之間、高糖與低糖對(duì)照組之間的差異均具有顯著性(P<0.05)。3、免疫細(xì)胞化學(xué)法（ICC）和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)12.5ml/L、25ml/L、50ml/L的HDI處理HRCECs培養(yǎng)72h后V

5、EGF的表達(dá)，隨著HDI濃度增高VEGF表達(dá)量減少，統(tǒng)計(jì)顯示HDI 干預(yù)組間及其與高糖對(duì)照組間灰度值及OD值差異均具有顯著性(P<0.05)。HDI能下調(diào)VEGF的表達(dá)，呈劑量依賴性。
　　結(jié)論
　　HDW對(duì)HRCECs的增殖有抑制作用，呈時(shí)間和劑量依賴性；并能下調(diào)細(xì)胞VEGF的表達(dá)，抑制新生血管形成；其在DR視網(wǎng)膜新生血管（Retinal neovasculariza-tion，NVR）的治療方面有重要應(yīng)用價(jià)值。