坦布蘇病毒對雛鵝的致病性研究.pdf

1、自2010年4月起，我國多地蛋鴨、種鵝養(yǎng)殖場相繼爆發(fā)了一種以產(chǎn)蛋量嚴重下降為主要臨床癥狀的新型傳染病，經(jīng)分離鑒定確定病原為坦布蘇病毒(Tembusu virus，TMUV)。坦布蘇病毒主要感染鴨，但也能感染鵝，造成鵝的發(fā)病和死亡。種鵝感染TMUV后嚴重影響種鵝產(chǎn)蛋量，雛鵝感染坦布蘇病毒發(fā)病嚴重，生長遲緩，最終可導致部分發(fā)病嚴重雛鵝死亡，已經(jīng)給我國養(yǎng)鵝業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。本研究用實驗室分離到的鴨源坦布蘇病毒分別對5日齡和20日齡的雛鵝進

2、行人工感染試驗，研究該病毒對雛鵝的致病性，旨在為今后鵝坦布蘇病毒感染的防控提供理論依據(jù)。
　　100只1日齡健康雛鵝平均分為5組，每組20只。1-4組為實驗組，5組為對照組。1-2組于5日齡、3-4組于20日齡分別經(jīng)靜脈和點眼滴鼻人工接種TMUVSDSG株（ELD50為10-2.17/0.2mL），5組接種等劑量的生理鹽水。觀察鵝的發(fā)病情況和臨床癥狀，在攻毒后第3d、6d、9d、12d于各組隨機選取3只雛鵝，采血并剖殺，觀察剖檢變

3、化，采集腦、肝臟、肺臟、胰臟、脾臟等，進行病理組織學觀察、載毒量分析和血液細胞因子測定。
　　結果顯示:發(fā)病鵝臨床癥狀主要表現(xiàn)為，5日齡靜脈注射攻毒組自攻毒后第4d開始發(fā)病，點眼滴鼻組自攻毒后第5d開始發(fā)病，發(fā)病鵝出現(xiàn)精神沉郁，厭食，排白綠色、棕色稀便，兩腿無力，站立不穩(wěn)，顫抖，生長遲緩，伴有腹部朝上兩腿掙扎呈游泳狀，角弓反張直至死亡等癥狀，偶見靜脈注射組發(fā)病鵝出現(xiàn)頭頸震顫神經(jīng)癥狀。自攻毒后第5d靜脈注射組有病鵝出現(xiàn)死亡，攻毒后第

4、6d點眼滴鼻組開始出現(xiàn)死亡，發(fā)病時間集中在攻毒后4-8d，死亡時間集中在攻毒后的5-8d，從第9d開始臨床癥狀逐漸減輕。20日齡攻毒組自攻毒5d后開始出現(xiàn)食欲下降，精神不振，排黃綠色稀便，病程維持3d左右，攻毒后8-9d臨床癥狀消失，采食量回升。分別在攻毒后第3d、6d、9d、12d測定攻毒鵝和對照鵝的體重，5日齡攻毒組較20日齡攻毒組發(fā)病鵝體重下降更為明顯。
　　病死鵝剖檢病變?yōu)槎鄠€組織器官的出血和壞死，包括腦膜充血、出血、腦水

5、腫;心冠脂肪出血、心內(nèi)膜出血、心肌壞死;肺水腫、出血、淤血;腺胃乳頭輕度出血;肝臟出血、壞死;胰腺水腫、壞死;脾臟腫大、出血;腎臟出血、水腫等病變。
　　病理組織學變化主要包括，腦血管周圍間隙變大水腫、腦膜有大量炎性細胞浸澗、充血、腦間質(zhì)散在小膠質(zhì)細胞增生;肝、胰腺、腎臟的腺管上皮細胞凋亡、壞死，腺管間隙擴張淤血;脾臟大量淋巴細胞凋亡空泡化;心肌斷裂、變性、壞死、心肌纖維間距變大并伴有炎性細胞浸潤;肺出血、淤血等病變明顯。

6、　　實時熒光定量PCR檢測結果顯示，胰腺和腦是病毒載量最高且持續(xù)時間最長的器官，心、脾、腎、腸、胸腺、法氏囊、腺胃含量則次之，相對表達量較低的器官主要是肝和肺。攻毒3d后各組織均可檢測到病毒，攻毒6d后病毒載量達到高峰，隨后病毒含量逐漸降低，攻毒后第12d肝、肺、胸腺和腺胃檢測不到病毒。比較5日齡攻毒組和20日齡攻毒組各組織器官的病毒載量，5日齡攻毒組是20日齡攻毒組的10倍以上。
　　細胞因子測定結果顯示:測定IL-4，IFN-

7、γ結果顯示，細胞因子水平呈現(xiàn)先下降后上升的總趨勢。人工感染雛鵝第3d，IL-4、IFN-γ的含量與對照組相比無明顯差異性;第6-9d，IL-4、IFN-γ含量低于對照組，自第9d開始IL-4、IFN-γ的含量開始逐漸上升，第12d可見IL-4、IFN-γ的含量高于對照組。
　　抗體水平測定結果顯示:在攻毒后第3d未檢測到坦布蘇病毒抗體，第6d可檢測到抗體，隨后抗體水平呈上升趨勢直至第12d依然上升。
　　綜上所述，坦布蘇病毒