VC及VE聯(lián)合應(yīng)用對(duì)紅細(xì)胞保存質(zhì)量的影響.pdf

1、臨床治療過程中為患者輸注紅細(xì)胞是提高血液運(yùn)氧能力，改善組織缺氧狀態(tài)的一種重要方法。為了保證足夠的紅細(xì)胞供應(yīng)，需要對(duì)其進(jìn)行儲(chǔ)存。但研究表明:紅細(xì)胞在4℃時(shí)其代謝并沒有完全停止，隨著貯存時(shí)間的延長，紅細(xì)胞會(huì)發(fā)生一系列生物化學(xué)與結(jié)構(gòu)上的改變，被稱之為紅細(xì)胞貯存損傷。這些損傷是影響輸注后紅細(xì)胞生存和功能改變的主要原因。
　　目前國內(nèi)應(yīng)用的MAP紅細(xì)胞保存液中含有:葡萄糖、磷酸二氫鈉加枸櫞酸鈉、枸櫞酸、腺嘌呤、甘露醇與氯化鈉;它可以起到防止

2、紅細(xì)胞溶血與凝血、為紅細(xì)胞提供能量、調(diào)節(jié)和穩(wěn)定溶液pH、維持滲透壓的作用。盡管如此，隨著紅細(xì)胞保存時(shí)間的延長，儲(chǔ)存損傷仍不可避免。
　　氧化應(yīng)激是導(dǎo)致紅細(xì)胞儲(chǔ)存損傷的重要機(jī)制之一。它是由活性氧族(reactive oxygen species:ROS)造成的。ROS的化學(xué)性質(zhì)活潑，能氧化紅細(xì)胞膜內(nèi)的脂質(zhì)及重要蛋白，改變胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，甚至引起紅細(xì)胞的死亡。
　　維生素C(Vitamin C，VC)又叫L-抗壞血酸，是一種水

3、溶性維生素。它不僅具有治療壞血病、預(yù)防動(dòng)脈硬化等作用;而且還具有較強(qiáng)的還原性，在體內(nèi)可作為抗氧化劑防止自由基對(duì)人體的傷害。維生素E(Vitamin E，VE)是一種脂溶性維生素，又稱生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。維生素E除了具有促進(jìn)性激素分泌、提高生育能力的作用外，它還具有保護(hù)紅細(xì)胞、抗自由基氧化的作用。
　　VC、VE均具有抗氧化作用。本研究向MAP保存液中加入VC及VE，觀察VC與VE是否會(huì)對(duì)貯存過程中的紅細(xì)胞形態(tài)、紅細(xì)胞內(nèi)

4、過氧化水平及抗氧化酶系的活性產(chǎn)生影響。
　　目的:
　　本研究通過在懸浮紅細(xì)胞內(nèi)加入抗氧化劑維生素C和維生素E，于儲(chǔ)存第7天、21天分別觀察紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，紅細(xì)胞內(nèi)過氧化水平及紅細(xì)胞內(nèi)主要抗氧化酶Cu，Zn-SOD、CAT和GSH-Px的活性，探討維生素C和維生素E聯(lián)合使用能否降低紅細(xì)胞的過氧化損傷，改善紅細(xì)胞保存質(zhì)量。
　　方法:
　　1血液標(biāo)本制備
　　采集健康志愿者血液制備去白懸浮紅細(xì)胞。分裝血液，

5、加入VC、VE使其終濃度分別為VC10m mol/L，VE2g/L/。
　　2測(cè)定指標(biāo)及方法
　　2.1紅細(xì)胞形態(tài)
　　通過掃描電鏡觀察紅細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變。
　　2.2紅細(xì)胞內(nèi)丙二醛含量測(cè)定
　　按照丙二醛含量測(cè)定試劑盒檢測(cè)紅細(xì)胞內(nèi)丙二醛含量。
　　2.3紅細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ROS)含量測(cè)定
　　按照ROS含量測(cè)定試劑盒檢測(cè)紅細(xì)胞內(nèi)ROS含量。
　　2.4紅細(xì)胞內(nèi)銅-鋅超氧化物歧化酶(Cu

6、-Zn SOD)活性測(cè)定
　　按照Cu-Zn SOD活性測(cè)定試劑盒操作步驟檢測(cè)Cu-Zn SOD的活性。
　　2.5紅細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性測(cè)定
　　按照GSH-PX活性測(cè)定試劑盒操作步驟檢測(cè)GSH-PX的活性。
　　2.6紅細(xì)胞內(nèi)過氧化氫酶(CAT)活性測(cè)定
　　按照CAT活性測(cè)定試劑盒操作步驟檢測(cè)CAT的活性。
　　結(jié)果:
　　1.紅細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的比較
　　紅細(xì)胞

7、掃描電鏡結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比VC及VE聯(lián)合應(yīng)用處理組在第7天、21天均觀察到棘型紅細(xì)胞的數(shù)量減少。
　　2.紅細(xì)胞內(nèi)MDA含量
　　7天對(duì)照組MDA含量為0.032±0.003 nmol/mgHb，VC+VE組為0.018±0.003 nmol/mgHb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　21天對(duì)照組MDA含量為0.059±0.007 nmol/mgHb，VC+VE組為0.039±0.004 nmol/

8、mgHb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　3.紅細(xì)胞內(nèi)ROS含量
　　7天對(duì)照組ROS含量為827.956±65.581，VC+VE組為731.186±33.963，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　21天對(duì)照組ROS含量為1108.778±40.105，VC+VE組為909.652±30.587，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　4.紅細(xì)胞內(nèi)Cu-Zn SOD活性

9、r>　　7天對(duì)照組Cu-Zn SOD活性為10.112±0.248 U/mgHb，VC+VE組為11.092±0.454 U/mg Hb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　21天對(duì)照組Cu-Zn SOD活性為5.471±0.281 U/mg Hb，VC+VE組為8.163±0.127 U/mg Hb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　5.紅細(xì)胞內(nèi)GSH-PX活性
　　7天對(duì)照組GSH-PX活

10、性為32.658±3.394活力單位/mgHb，VC+VE組為51.341±4.041活力單位/mgHb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　21天對(duì)照組GSH-PX活性為22.097±3.167活力單位/mgHb，VC+VE組為29.958±5.087活力單位/mgHb，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　6.紅細(xì)胞內(nèi)CAT活性
　　7天對(duì)照組CAT活性為1.327±0.08 U/mgHb，V