癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠海馬、皮質(zhì)GABAA受體α1蛋白的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 探討不同時(shí)程癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus，SE)對(duì)大鼠海馬和皮質(zhì)GABAA受體α1蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠18只，體重250±20 g，隨機(jī)分成對(duì)照組、SE1 h組和SE2 h組。建立氯化鋰-匹羅卡品SE模型。各組腦組織用振動(dòng)切片機(jī)進(jìn)行矢狀位切片，片厚300μm。每只老鼠取3張腦片，用sulfo-NHS-SS-b

2、iotin孵育腦片、標(biāo)記細(xì)胞膜蛋白。解剖顯微鏡下分離海馬和皮質(zhì)組織，分別勻漿，獲得海馬細(xì)胞蛋白和皮質(zhì)細(xì)胞蛋白。采用Bradford法測(cè)定蛋白濃度。取不同部位細(xì)胞勻漿蛋白150μg與neutravidin beads孵育過(guò)夜，離心獲得膜蛋白。以GAPDH為細(xì)胞內(nèi)蛋白標(biāo)志分子，以鈉鉀ATP酶為細(xì)胞和細(xì)胞膜蛋白內(nèi)參，進(jìn)行Western blot半定量檢測(cè)，觀察SE對(duì)海馬和皮質(zhì)GABAA受體α1亞基的細(xì)胞和細(xì)胞膜表達(dá)水平的影響。
　　

3、結(jié)果：
　　 1.氯化鋰-匹羅卡品SE模型：12只SD大鼠，91.7％誘發(fā)出SE，死亡率為9.3％，總成功率為83.3％。
　　 2.SE對(duì)GABAA受體α1亞基細(xì)胞表達(dá)水平的影響
　　 (1)海馬區(qū)：與對(duì)照組相比較，SE1 h組和SE2 h組中GABAA受體α1亞基的細(xì)胞表達(dá)量無(wú)明顯變化(P>0.05)。
　　 (2)皮質(zhì)區(qū)：與對(duì)照組相比較，SE1 h組和SE2 h組中GABAA受體α1亞基的細(xì)胞表達(dá)量

4、無(wú)明顯變化(P>0.05)。
　　 3.SE對(duì)GABAA受體α1細(xì)胞膜表達(dá)水平的影響
　　 (1)海馬區(qū)：與對(duì)照組相比，SE1 h組、SE2 h組GABAA受體α1亞基的細(xì)胞膜表達(dá)水平均明顯下降(P<0.01)，且SE2 h組較SE1 h組下降更明顯(P<0.01)；
　　 (2)皮質(zhì)區(qū)：與對(duì)照組比，SE1 h組GABAA受體α1亞基的細(xì)胞膜表達(dá)無(wú)明顯變化(P>0.05)，但SE2 h組中GABAA受體α1亞基的