長托寧對癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)后大鼠海馬神經(jīng)元保護作用的研究.pdf

1、目的：長托寧(鹽酸戊乙奎醚注射液)是一種新型的腦保護劑，有報道顯示長托寧可以減輕急性全腦缺血/再灌注時腦組織損傷，起到腦保護作用。但長托寧對癲癇持續(xù)狀態(tài)導致的腦損傷是否有保護作用尚未見研究報道。本研究用長托寧預處理，采用氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射的方法制備癲癇持續(xù)狀態(tài)模型，觀察癲癇持續(xù)狀態(tài)后不同時間點大鼠海馬組織凋亡相關基因Caspase-3、Bcl-2的表達情況，并且與山莨菪堿相比較，探討長托寧干預對癲癇持續(xù)狀態(tài)導致的神經(jīng)元損傷的影響及

2、可能機制，以期為長托寧應用于臨床癲癇持續(xù)狀態(tài)的治療提供可能的動物實驗依據(jù)。
　　 方法：健康成年雄性Wistar大鼠78只隨機分為對照組(n=6只)、模型組(n=24只)、山莨菪堿組(n=24只)和長托寧組(n=24只)，后三組又分別分為四個亞組，每個亞組6只，用于6h、12h、24h、48h。山莨菪堿組和長托寧組分別在造模前提前15分鐘腹腔注射山莨菪堿15mg/kg，長托寧2mg/kg，每12小時重復腹腔注射一次，劑量同前。對

3、照組于相應時間點腹腔注射等容量的生理鹽水。15分鐘后模型組、山莨菪堿組、長托寧組按127mg/Kg給予腹腔注射氯化鋰，18小時后再腹腔注射新鮮配制的匹羅卡品30mg/Kg，制備癲癇持續(xù)狀態(tài)模型，同時給對照組大鼠腹腔注射等容量的生理鹽水。觀察大鼠出現(xiàn)癇性發(fā)作的時間和表現(xiàn)，造模過程中大鼠死亡或不符合模型要求，予以剔除并隨機補充，以保證每組動物數(shù)量。在癲癇持續(xù)狀態(tài)后相應時間點斷頭取腦，對海馬組織進行研究，HE染色，光鏡下觀察形態(tài)學變化，原位末

4、端標記法(TUNEL)檢測大鼠海馬神經(jīng)元凋亡，免疫組化法檢測Bcl-2和Caspase-3蛋白的表達。
　　 結果：TUNEL、bcl-2和Caspase-3陽性細胞在對照組僅有微量的基礎表達，模型組、山莨菪堿組和長托寧組癲癇持續(xù)狀態(tài)后6h海馬組織可見TUNEL、Caspase-3和Bcl-2陽性細胞表達增多,TUNEL和Caspase-3表達高峰均在24h；Bcl-2表達高峰在12h。山莨菪堿組和長托寧組各時間點TUNEL、C

5、aspase-3陽性細胞數(shù)較模型組明顯減少(除6h時外，均為P＜0.05)，而Bcl-2陽性細胞數(shù)明顯增加(除6h外，均為P＜0.05)，且長托寧組較山莨菪堿組變化明顯(P＜0.05)。
　　 結論：(1)長托寧和山莨菪堿預處理不能完全防止癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)生，但可延遲其出現(xiàn)的時間，并減輕其發(fā)作強度，顯著減輕海馬神經(jīng)元的損傷，提示其神經(jīng)保護作用的存在。(2)癲癇持續(xù)狀態(tài)后Caspase-3和bcl-2蛋白的表達均出現(xiàn)變化，證實這兩種