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文檔簡介
1、目的:研究神經(jīng)軸突再生抑制因子Nogo-A在發(fā)育期大鼠腦癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織內(nèi)的表達(dá)水平變化,并觀察側(cè)腦室注射Nogo-A反義寡聚核苷酸對其表達(dá)變化的影響。為進(jìn)一步完善癲癇性腦損傷的分子生物學(xué)機(jī)制提供依據(jù)。
方法:腹腔注射戊四氮制作發(fā)育期SD大鼠(生后7天、14天、21天和28天四個日齡組)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)發(fā)作模型。將各日齡組隨機(jī)分為NS組、SE組,雌雄不限,選擇處理后6小時、1
2、2小時、1天、2天、3天、7天七個時間點,采用RT-PCR和Western blot方法分別檢測Nogo-AmRNA和Nogo-A蛋白在海馬組織的含量變化。干預(yù)實驗選擇生后21天SD大鼠,隨機(jī)分為反義寡聚核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)干預(yù)組(AS組)、隨機(jī)序列干預(yù)組(NAS組)及非干預(yù)組(NS組),每組6只,雌雄不限,各組均于操作后6小時制作SE發(fā)作模型,選擇處理后6h采用RT-PCR
3、檢測干預(yù)后Nogo-AmRNA及處理后1天Western blot檢測干預(yù)后Nogo.A蛋白在海馬組織的含量變化。
結(jié)果:
(1)各日齡組SE后6h Nogo-AmRNA含量較NS組明顯升高,P均<0.05,14日齡組在SE后12h Nogo-AmRN,A含量較NS組也明顯升高,P<0.05;而各日齡組SE后其余各時間點與NS組比較無統(tǒng)計學(xué)差異,P>0.05;各日齡組SE后12h Nogo-A蛋白含量較NS組
4、明顯升高,P均<0.05,7日齡SE后6h組及21日齡SE后1d組Nogo-A含量也較NS組明顯升高,P<0.05,而各日齡組SE后其余各時間點與NS組之間無統(tǒng)計學(xué)差異,P>0.05:Nogo-A mRNA提前于Nogo-A蛋白發(fā)生變化,但兩者變化趨勢一致。
(2)在正常發(fā)育過程中,Nogo-AmRNA和Nogo-A蛋白在14日齡表達(dá)較其它日齡組明顯增高,P<0.05。
(3)Nogo-AmRNA表達(dá)在ASO
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