呼吸道合胞病毒感染對(duì)哮喘小鼠中轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3表達(dá)的影響及其與IFN-γ、IL-4相關(guān)性分析.pdf

1、目的：
　　研究RSV感染哮喘小鼠后小鼠肺組織中T-bet、GATA-3的表達(dá)變化及細(xì)胞因子IFN-γ及IL-4在外周血中的水平，并分析其相關(guān)性。
　　方法：
　　健康雌性Balb/c小鼠40只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組、呼吸道合胞病毒(RSV)組、哮喘組、雙重干預(yù)組，每組10只。通過(guò)卵白蛋白致敏及霧化激發(fā)建立哮喘模型，通過(guò)鼻腔滴入的方式感染RSV。各組小鼠于最后一次激發(fā)后24 h，處死動(dòng)物進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè):取小鼠肺組織蘇

2、木精-伊紅（HE）染色觀察病理改變，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)半定量方法檢測(cè)肺組織RSV、T-bet、GATA-3 mRNA表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)血清中IFN-γ、IL-4的含量變化。
　　結(jié)果：
　　1.肺組織病理染色顯示。
　　正常組無(wú)明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)支氣管管壁完整，肺泡間隔細(xì);RSV組肺泡間隔充血，水腫，增厚，斷裂，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較明顯;哮喘組細(xì)支氣管粘膜增厚，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，

3、管腔狹窄，肺泡上皮破壞;雙重干預(yù)組在氣管周圍大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)形成，肺泡間隔增厚，炎性浸潤(rùn)較前3組明顯增多。
　　2.肺組織RSV mRNA鑒定結(jié)果顯示。
　　正常組和哮喘組未檢測(cè)到RSV mRNA表達(dá)，而RSV組及雙重干預(yù)組中RSVmRNA表達(dá)明顯，證明感染成功。
　　3.肺組織中T-bet及GATA-3 mRNA表達(dá)及與血清中IFN-γ、IL-4相關(guān)性分析。
　　哮喘組、RSV組和雙重組T-bet表達(dá)較正常組明

4、顯降低，其中雙重組比前兩組表達(dá)亦明顯降低，與IFN-γ變化呈正相關(guān);而GATA-3在哮喘組、RSV組和雙重組表達(dá)較正常組明顯增高，而其中雙重組比前兩組表達(dá)顯著增高，且與IL-4表達(dá)量成正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.RSV感染哮喘小鼠可以導(dǎo)致T-bet低表達(dá)和GATA-3高表達(dá)，改變程度較單純RSV感染組和哮喘組小鼠更明顯，提示二者在RSV加重哮喘機(jī)制方面起到一定作用。
　　2.T-bet和GATA-3與IFN-γ、IL