尋常型銀屑病中T-bet和GATA-3表達(dá)的研究.pdf

1、銀屑病是一常見的免疫性、炎癥性皮膚病，呈慢性經(jīng)過，反復(fù)發(fā)生，多數(shù)患者終生受累。目前的治療手段有限，治療效果不盡人意。因此，該病給患者帶來生理和心理上的極大痛苦。雖然銀屑病至今病因不明，但目前公認(rèn)該病是在一定的遺傳背景基礎(chǔ)上發(fā)生T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫紊亂所致，其中Th1分化優(yōu)勢及Th1型細(xì)胞因子在介導(dǎo)銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用。 目的： 近年來，已經(jīng)證實(shí)了T細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3是決定Th1和Th2極

2、性分化的關(guān)鍵因素。T-bet是T-box家族Tbr1亞家族成員，在Th1細(xì)胞分化中起著核心作用，它不僅控制Th1細(xì)胞特征性細(xì)胞因子IFN-γ的表達(dá)，而且抑制Th2細(xì)胞特征性細(xì)胞因子IL-4的產(chǎn)生，還能誘導(dǎo)已定向的Th2細(xì)胞向相反的Th1細(xì)胞分化，因而被確認(rèn)為目前所知唯一的Th1特異性轉(zhuǎn)錄因子。GATA-3則促進(jìn)。Th2細(xì)胞特征性細(xì)胞因子(IL-4等)的產(chǎn)生，是Th2特異性轉(zhuǎn)錄因子。 由于T-bet和GATA-3在Th細(xì)胞分化中的

3、重要作用，人們對(duì)它們與Th1和Th2漂移性疾病的關(guān)系產(chǎn)生了濃厚的興趣。國內(nèi)外的學(xué)者也為此做了大量的工作，對(duì)于T-bet、GATA-3與哮喘、炎癥性腸病、異位性皮炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病的關(guān)系都有了相應(yīng)的研究。最近已有國內(nèi)的學(xué)者對(duì)銀屑病患者外周血PBMCT-bet和GATA-3的表達(dá)水平進(jìn)行了研究，但至今國內(nèi)外均未見關(guān)于銀屑病患者組織和外周血T-bet／GATA-3表達(dá)情況的研究報(bào)道。 本研究旨在以特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA

4、-3、Th1／Th2平衡為核心，比較尋常型銀屑病患者與正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平以及外周血單一核細(xì)胞T-bet和GATA-3的基因表達(dá),同時(shí)還比較患者皮損和正常人皮膚組織T-bet和GATA-3的表達(dá),初步闡明T-bet和GATA-3在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的意義. 對(duì)象和方法銀屑病患者外周血標(biāo)本來源為2006年9月至2007年3月住院及門診就診的進(jìn)行期尋常型銀屑病病人，抽血前1月內(nèi)無系統(tǒng)用藥史，除外其他免疫相關(guān)性疾病如腫瘤，肝

5、炎，糖尿病等。健康對(duì)照組均取自正常體檢人群，經(jīng)血常規(guī)、大小便常規(guī)和肝腎功能等檢測均顯示正常，無重大疾病史。銀屑病患者皮膚組織標(biāo)本來源為2006年9月至2007年3月住院及門診就診的進(jìn)行期尋常型銀屑病病人，收取標(biāo)本前1月內(nèi)無系統(tǒng)用藥史，所取皮損為兩周內(nèi)新發(fā)，未予局部藥物治療。正常對(duì)照組均取自外科手術(shù)病人正常腹部皮膚組織。 方法： 采用ELISA法檢測銀屑病患者與正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平，RT-PCR法比較銀

6、屑病患者與正常人外周血T-bet和GATA-3的基因表達(dá)，同時(shí)用免疫組化的方法比較患者皮損和正常人皮膚T-bet和GATA-3的表達(dá)。 結(jié)果： 1.尋常型銀屑病患者血清IFN-7和IL-4濃度21例尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度為16.20±2.OOpg／ml，20例正常對(duì)照組血清IFN-γ濃度為14.78±1.96pg／ml，兩者差異具有顯著性(P<0.05)；21例尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度為22.12+6

7、.70pg／ml，20例正常對(duì)照組血清IL-4濃度為26.30±+5.91pg／ml，兩者差異也具有顯著性(P<0.05)。 2.尋常型銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞T-bet和GATA-3的表達(dá)21例尋常型銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞T-bet的表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組(P

8、屑病患者血清IFN-γ濃度與外周血單一核細(xì)胞T-bet表達(dá)量的相關(guān)系數(shù)為0.803(PO．33)，兩者之間表現(xiàn)的相關(guān)性較為明顯。 3.2 T-bet表達(dá)水平與IL-4濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度與外周血單一核細(xì)胞T-bet表達(dá)量的相關(guān)系數(shù)為-0.072(P>O．05

9、)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 3.3 GATA-3表達(dá)水平與IFN-γ濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度與外周血單一核細(xì)胞GATA-3表達(dá)量的相關(guān)系數(shù)為-O．5244(P>0.05)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 3.4 GATA-3表達(dá)水平與IL-4濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度與外周血單一核細(xì)胞GATA-3表達(dá)量的相關(guān)系數(shù)為0.452(P>0.05)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 4.尋常

10、型銀屑病患者皮損與正常人皮膚中CD4和CD8表達(dá)水平的比較 (1)CD4在銀屑病患者皮損中主要表達(dá)于淋巴細(xì)胞胞膜上，主要是皮損組織真皮乳頭層浸潤的淋巴細(xì)胞以及幾乎所有移入表皮棘層的淋巴細(xì)胞呈陽性表達(dá)；在正常人皮膚中幾乎未見有CD4的表達(dá)。兩者比較有顯著性差異(P

11、表達(dá)。兩者比較無顯著性差異(P>O．05)。 5.尋常型銀屑病患者皮損與正常人皮膚中T-bet和GATA-3表達(dá)水平的比較 (1)T-bet在銀屑病患者皮損中主要表達(dá)于淋巴細(xì)胞胞核內(nèi)，大多數(shù)陽性的淋巴細(xì)胞位于真皮乳頭層，在移入表皮棘層的淋巴細(xì)胞胞核內(nèi)也有部分表達(dá)，在真皮乳頭部擴(kuò)張的血管周圍浸潤的大部分淋巴細(xì)胞中表達(dá)為陽性，而且染色相對(duì)較深；T-bet在正常人皮膚中幾乎未見表達(dá)。兩者比較有顯著性差異(P

12、過對(duì)同一患者兩張切片的粗略比較發(fā)現(xiàn)CD4表達(dá)較強(qiáng)的皮損組織T-bet的表達(dá)也相對(duì)較強(qiáng)，但陽性淋巴細(xì)胞浸潤的范圍及部位卻不太一致。 (2)GATA-3只有在少數(shù)銀屑病患者皮損組織的淋巴細(xì)胞胞核中有散在表達(dá)，且表達(dá)較弱：GATA-3也只有在少數(shù)正常皮膚組織的淋巴細(xì)胞胞核中有散在表達(dá)，且表達(dá)較弱。兩者比較無顯著性差異(P>O．05)。 結(jié)論： 1.尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度高于正常對(duì)照組，IL-4濃度低于正常對(duì)

13、照組，進(jìn)一步證實(shí)銀屑病存在Th1分化優(yōu)勢。 2.尋常型銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞T-bet的表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組，而且T-bet表達(dá)水平與血清IFN-γ濃度呈顯著正相關(guān)；尋常型銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞GATA-3的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組，但與血清IFN-γ濃度無顯著相關(guān)性。提示T-bet可能是通過與IFN-γ形成的正反饋調(diào)節(jié)環(huán)在尋常型銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中起到重要的促進(jìn)作用，而GATA-3對(duì)進(jìn)行期尋常型銀屑病則起到負(fù)性調(diào)節(jié)的作