轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表達(dá)情況的研究.pdf

1、目的：⑴了解肝癌患者外周血中是否存在Treg優(yōu)勢化現(xiàn)象。⑵研究肝癌患者外周血中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3、RORgammat 及FOXP3的表達(dá)情況。
　　 方法：抽取實(shí)驗(yàn)組20例肝癌患者與對(duì)照組20例健康志愿者的外周靜脈血，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周靜脈血單個(gè)核細(xì)胞中CD4+CD25+T細(xì)胞占CD4+細(xì)胞比例；采用熒光定量PCR法檢測外周靜脈血單個(gè)核細(xì)胞中Th1、Th2、Th17及

2、Treg各自的主要特異轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3、RORgammat 及FOXP3的mRNA表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：原發(fā)性肝癌組外周血單個(gè)核細(xì)胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T細(xì)胞比例要顯著高于對(duì)照組（17.72±4.97 VS 9.22±2.68, P<0.01），Treg的特異轉(zhuǎn)錄因子FOXP3 mRNA的表達(dá)肝癌組明顯高于對(duì)照組（3.17±1.59 VS 1.39±1.13, P<0.01），斯皮爾曼相關(guān)性分

3、析顯示FOXP3mRNA表達(dá)與CD4+CD25+Treg 細(xì)胞量呈正相關(guān)（肝癌組r=0.761, P<0.01）。Th1的特異轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA的表達(dá)肝癌組顯著低于對(duì)照組（52.34±34.07 VS 104.±56.00,P<0.01），而Th2的特異轉(zhuǎn)錄因子GATA-3 mRNA 的表達(dá)則高于對(duì)照組（1.38±1.15 VS0.58±0.65, P<0.05），T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明顯減?。?6

4、.01±116.71 VS461.88±708.81, P<0.05）。Th17的特異轉(zhuǎn)錄因子RORgammat mRNA表達(dá)水平肝癌組較對(duì)照組明顯升高（72.32±32.82 VS 33.07±22.86, P<0.01）。
　　 結(jié)論：⑴原發(fā)性肝癌組外周血中CD4+CD25+Treg細(xì)胞明顯增多及其特異轉(zhuǎn)錄因子FOXP3mRNA 表達(dá)水平明顯升高，且兩者呈正相關(guān)關(guān)系，說明原發(fā)性肝癌患者外周血呈現(xiàn)CD4+CD25+Treg 細(xì)

5、胞優(yōu)勢化現(xiàn)象，其腫瘤局部微環(huán)境中負(fù)性調(diào)節(jié)因素增加，將會(huì)有助于腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。⑵原發(fā)性肝癌患者外周血中Th1特異轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA表達(dá)下降，Th2 特異轉(zhuǎn)錄因子GATA-3mRNA表達(dá)升高，兩者比值明顯下降，說明原發(fā)性肝癌患者存在Th1/Th2平衡失調(diào)，其抗腫瘤免疫應(yīng)答受限制，可能是其腫瘤免疫逃逸的機(jī)制之一。⑶原發(fā)性肝癌患者外周血中Th17特異性轉(zhuǎn)錄因子RORgammat mRNA升高，提示肝癌患者外周血存在Th17優(yōu)勢化現(xiàn)象