卡介苗對哮喘小鼠轉錄因子T-bet與GATA-3表達的影響.pdf

1、支氣管哮喘是由嗜酸性粒細胞、肥大細胞和T淋巴細胞等多種炎性細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病。研究證實，支氣管哮喘的發(fā)病與Th1/Th2失衡有著密切關系，Th2細胞活化亢進是哮喘發(fā)病的重要機理。目前對哮喘防治重點已由單純抗呼吸道痙攣轉向抗炎治療，尤其如何促進Th0型細胞向Th1轉化，抑制Th2細胞從而控制哮喘發(fā)展。現(xiàn)有資料發(fā)現(xiàn)多種轉錄因子或細胞內信號途徑與Th細胞分化有關。其中轉錄因子GATA-3和T-bet在其中發(fā)揮著重要作用。有

2、人認為T-bet與GATA-3的平衡決定了T細胞在黏膜免疫的命運，決定了Th1/Th2平衡的穩(wěn)定性[3]?？ń槊纾˙CG）作為非特異性免疫反應調節(jié)劑，能抑制Th2型免疫反應而上調Th1型免疫反應，減輕氣道炎癥反應。但卡介苗是否調節(jié)轉錄因子T-bet與GATA-3的平衡來減輕氣道炎癥尚未見報道。 目的：通過建立小鼠哮喘模型，給小鼠分別進行預防和治療性接種BCG，觀察BCG對哮喘小鼠T淋巴細胞轉錄因子T-bet蛋白與GATA-3蛋白

3、表達的影響并比較預防和治療性接種的差異，探討其可能的機制。 方法：32只雄性昆明小鼠隨機分成正常對照組（A組），哮喘模型組（B組），BCG預防組（C組），BCG治療組（D組）。通過卵清蛋白致敏建立哮喘模型。觀察4組小鼠的一般情況；肺泡灌洗液的細胞分類；肺組織的病理切片；用免疫組化半定量分析法檢測肺組織中T-bet和GATA-3蛋白的表達。 結果： 1.BALF檢查顯示： 哮喘組（B組）與對照組（A組）比較

4、，BALF中白細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞比例均明顯升高（P<0.01）。BCG接種各組與哮喘組（B組）比較均能明顯降低BALF中白細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞比例（P<0.01），接種兩組之間無顯著差異（P>0.05）。 2.病理檢查顯示： 病理學HE染色發(fā)現(xiàn)：對照組（A組）小鼠肺內幾乎無炎性細胞浸潤；而哮喘組（B組）小鼠肺內可見大量炎性細胞和浸潤，其炎性細胞浸潤程度與對照組（A組）比較明顯增加（P<0.01）。BCG接種后，炎性

5、細胞浸潤程度較哮喘組（B組）明顯降低（P<0.01），但仍然比對照組（A組）嚴重（P<0.01）。 3.免疫組化結果顯示： 哮喘組（B組），卡介苗預防組（C組），卡介苗治療組（D組）的T-bet表達量顯著低于對照組（A組），其差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0.01）；卡介苗預防組（C組），卡介苗治療組（D組）的T-bet表達量與哮喘組（B組）比較明顯增多，差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0.01）?？ń槊缃臃N兩組之間的比較差異無統(tǒng)

6、計學意義（P>0.05）。哮喘組（B組），卡介苗預防組（C組），卡介苗治療組（D組）的GATA-3表達量顯著高于對照組（A組），其差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0.01）；卡介苗預防組（C組），卡介苗治療組（D組）的GATA-3表達量與哮喘組（B組）比較明顯減少，差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0.01）；卡介苗接種兩組之間的比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 4.相關分析顯示： 哮喘組（B組）小鼠轉錄因子T-bet蛋白表達量

7、與氣道炎癥呈顯著負相關（r=-0.954 P<0.01），與肺泡灌洗液中嗜酸性粒細胞數(shù)百分比呈顯著負相關（r=-0.900 P<0.01）；哮喘組（B組）小鼠轉錄因子GATA-3蛋白表達量與氣道炎癥呈顯著正相關（r=0.954 P<0.01），與肺泡灌洗液中嗜酸性粒細胞數(shù)百分呈顯著正相關（r=0.811 P<0.05）；哮喘組（B組）小鼠轉錄因子T-bet蛋白表達量與轉錄因子GATA-3蛋白表達量呈顯著負相關（r=-0.981，P<0.

8、01）。 結論：1.通過OVA致敏激發(fā)成功的造成了哮喘的小鼠模型，在支氣管哮喘模型中，轉錄因子T-bet和GATA-3失衡表達，表現(xiàn)為T-bet低表達，GATA-3高表達，T-bet表達量與GATA-3表達量呈負相關。T-bet和GATA-3蛋白表達量分別與氣道炎癥呈直線相關，T-bet和GATA-3的失衡表達很可能是哮喘氣道炎癥形成的重要原因之一。2.BCG不僅能夠增加轉錄因子T-bet蛋白的表達，同時能夠抑制轉錄因子GATA