鄰苯二甲酸二乙基己酯對小鼠學(xué)習(xí)與記憶的影響及機(jī)制研究.pdf

1、鄰苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate，DEHP）因其具有良好的可塑性和延展性，作為一種塑化劑常被廣泛用于各種塑料制品的生產(chǎn)，這些塑料制品涉及到人類生活的各個(gè)方面，例如兒童玩具、化妝品、食品包裝、醫(yī)用輸血管、塑料薄膜等。在塑料制品中，DEHP與PVC材料不能形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵連接，而是以氫鍵或范德華力結(jié)合，故在加熱或與油脂等接觸時(shí)容易進(jìn)入到環(huán)境中，通過呼吸、皮膚接觸或直接食入等方式進(jìn)入人體。已有的研究結(jié)

2、果表明，DEHP在體內(nèi)具有雌激素樣作用，可干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，對肝臟、睪丸等器官產(chǎn)生損傷，進(jìn)而影響生殖發(fā)育等。越來越多的研究證據(jù)顯示，DEHP也可對神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，進(jìn)而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能，但其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　研究發(fā)現(xiàn)DEHP可引起大腦的過氧化損傷，而過氧化損傷可導(dǎo)致學(xué)習(xí)與記憶功能障礙。我們推測DEHP可通過過氧化損傷引起學(xué)習(xí)與記憶能力障礙，因此，本實(shí)驗(yàn)以昆明小鼠作為研究對象，通過灌胃給予DEHP，以研究DEHP

3、對小鼠學(xué)習(xí)與記憶能力的影響及其潛在的作用機(jī)制。分別每天給予小鼠DEHP處理，或給予不同濃度的抗氧化劑維生素E(VitaminE，VitE)預(yù)處理后再給予DE-HP等，以上藥物連續(xù)處理3周后，利用Morris水迷宮、新異物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)方法檢測上述處理對小鼠學(xué)習(xí)與記憶能力的影響。通過用免疫印跡方法檢測參與調(diào)控記憶形成及鞏固過程中相關(guān)蛋白的含量及活性改變，如PKA、CREB、PSD-95、BDNF等以探討DEHP導(dǎo)致學(xué)習(xí)與記憶損傷的可能

4、機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)以250mg/kg/day劑量的DEHP連續(xù)灌胃3周，小鼠未產(chǎn)生急性的毒性反應(yīng)，體重及活動(dòng)量也無明顯變化。但用高架十字迷宮方法檢測發(fā)現(xiàn)，DEHP組進(jìn)入開放臂的時(shí)間及次數(shù)顯著低于對照組，顯示出焦慮狀態(tài)，而VitE預(yù)處理組可緩解小鼠的焦慮情緒變化。(2)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，DEHP組小鼠在定位航行階段找到平臺(tái)的潛伏期明顯延長，空間探索階段在平臺(tái)所在象限的搜索時(shí)間和穿越平臺(tái)所在象限的次數(shù)減少，VitE預(yù)處理組能改善

5、上述變化，并具有VitE濃度相關(guān)性。(3)新異物體識(shí)別任務(wù)中，DEHP處理組小鼠對新物體的識(shí)別能力相比于對照組顯著性降低，辨別指數(shù)差異顯著，提示DEHP損傷了小鼠的記憶識(shí)別能力;VitE預(yù)處理組能顯著增加小鼠探索新物體的時(shí)間，增強(qiáng)小鼠物體識(shí)別能力，并具有劑量相關(guān)性。(4)海馬組織內(nèi)活性氧族(ROS)及丙二醛(MDA)含量的檢測結(jié)果表明:與對照組相比，DEHP組小鼠ROS熒光值和MDA含量顯著性增加，不同濃度的VitE預(yù)處理能阻止ROS和

6、MDA的含量升高。(5)免疫印跡結(jié)果顯示，與對照組相比，DEHP處理組PKA的活性及其下游作用底物CREB的Ser133位點(diǎn)的磷酸化水平顯著降低，同時(shí)DEHP處理會(huì)引起記憶相關(guān)蛋白PSD-9及BDNF的表達(dá)減少;而給予不同濃度的VitE預(yù)處理可阻止DEHP誘導(dǎo)的PKA及CREB的活性下調(diào)，增加PSD-95和BDNF的含量，結(jié)果有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　以上結(jié)果表明:DEHP處理可能導(dǎo)致小鼠大腦的過氧化損傷，進(jìn)而引起小鼠空間學(xué)習(xí)與記