魚(yú)精蛋白對(duì)STZ誘導(dǎo)早期DR大鼠眼底新生血管抑制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：糖尿病視網(wǎng)膜病變（Diabetic Retinopathy，DR）新生血管的發(fā)生是由于在缺血缺氧狀態(tài)下血管形成促進(jìn)因子和抑制因子的平衡狀態(tài)被打破所致。在所有的平衡調(diào)節(jié)因子中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF）是新生血管生成的主要促進(jìn)因子，而色素上皮衍生因子（pigment epithelium derived factor，PEDF）則為主要的抑制因子。尋求有效的藥物來(lái)

2、阻斷或調(diào)控它們之間的平衡以防治新生血管的發(fā)生一直是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)建立早期DR大鼠模型，觀察視網(wǎng)膜形態(tài)改變及玻璃體腔注射魚(yú)精蛋白后，對(duì)玻璃體及血清中VEGF與PEDF表達(dá)的影響。方法：90只大鼠隨機(jī)平分為9組，分別為空白對(duì)照組1個(gè)、糖尿病模型對(duì)照組5個(gè)（M1、M2、M3、M4、M5月）和注藥組3個(gè)（注M3、注M4、注M5月）；除空白對(duì)照組外所有大鼠進(jìn)行鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ）腹腔注射建立糖尿病模型。造模成功

3、后觀察3月，給予注藥組魚(yú)精蛋白（50μg/5μL）玻璃體腔注射，觀察一周后處死10只大鼠（注M3組），余注藥組大鼠在糖尿病程4月予魚(yú)精蛋白（50μg/5μL）第二次玻璃體腔注射，觀察一周后處死10只大鼠（注M4組），同上在病程5月大鼠予魚(yú)精蛋白（50μg/5μL）第三次玻璃體腔注射，觀察一周后處死10只大鼠（注M5組），分別進(jìn)行HE染色視網(wǎng)膜病理切片，觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變；視網(wǎng)膜組織免疫組化切片染色評(píng)價(jià)VEGF、PEDF的表達(dá)強(qiáng)度；酶聯(lián)

4、免疫吸附測(cè)定法（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays，ELISA）檢測(cè)大鼠玻璃體視網(wǎng)膜組織勻漿和血清中的VEGF和PEDF蛋白的含量。結(jié)果：魚(yú)精蛋白干預(yù)組視網(wǎng)膜病理切片與模型對(duì)照組比較顯示視網(wǎng)膜內(nèi)界膜增厚減輕，毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞核突破內(nèi)界膜的數(shù)量減少，但視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層（Retinal Ganglion，RGCs）排列仍不整齊，內(nèi)核層可見(jiàn)空泡樣改變。視網(wǎng)膜組織免疫組化切片染色顯示魚(yú)精蛋白干預(yù)組視網(wǎng)膜組織內(nèi)V

5、EGF蛋白的表達(dá)強(qiáng)度較模型對(duì)照組均明顯降低（P<0.05），PEDF的表達(dá)均明顯升高（P<0.05），但VEGF和PEDF的表達(dá)趨勢(shì)并不隨著注藥次數(shù)的增加而改變。ELISA檢測(cè)干預(yù)組大鼠玻璃體VEGF蛋白和PEDF蛋白的表達(dá)均較模型對(duì)照組有明顯的降低和升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但VEGF和PEDF的表達(dá)趨勢(shì)并不隨著注藥次數(shù)的增加而改變。而血清中VEGF和PEDF的表達(dá)與模型對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)