山女鱒源致病性水霉菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、山女鱒（Oncorhynchus masou masou）自引入我國(guó)并成功的完成人工繁育以來(lái)，基于其味道鮮爽，肉質(zhì)細(xì)滑，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高及具有保健作用等優(yōu)點(diǎn)，深受消費(fèi)者們的青睞，因此在我國(guó)具有廣闊的市場(chǎng)前景。近年來(lái)，隨著山女鱒養(yǎng)殖規(guī)模和人工養(yǎng)殖技術(shù)的不斷壯大及快速發(fā)展，頻發(fā)的各種病害常常造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。尤其是水霉病，由于其發(fā)病迅速，感染范圍廣，死亡率高而給山女鱒產(chǎn)業(yè)帶來(lái)了極大困擾并且嚴(yán)重阻礙了其持續(xù)發(fā)展。
　　本實(shí)驗(yàn)分離純化一株山女

2、鱒源致病性水霉菌株，通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法對(duì)其進(jìn)行鑒定，并進(jìn)行了人工感染魚(yú)卵的實(shí)驗(yàn)，研究了不同生長(zhǎng)條件對(duì)菌株生物學(xué)特性的影響和藥物防治水霉菌感染的效果。為水霉菌生物學(xué)特性及山女鱒水霉病的防治提供理論基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.采用傳統(tǒng)的方法分離純化一株水霉菌株，將其命名為SN。通過(guò)附著在油菜籽上水霉菌絲的形態(tài)，觀察到其菌絲分枝較少，呈透明管狀，無(wú)橫隔;菌絲頂端可生成棒狀孢子囊，內(nèi)部產(chǎn)生游動(dòng)孢子，游動(dòng)孢子成熟后，便

3、從孢子囊中迅速釋放出，而新孢子囊以層出方式或側(cè)生出芽方式發(fā)生。在一定的生長(zhǎng)條件下，菌絲頂端或中間可見(jiàn)球形或不規(guī)則形狀的厚垣孢子。當(dāng)生長(zhǎng)環(huán)境良好時(shí)，可產(chǎn)生藏卵器和雄器進(jìn)行有性繁殖。這些形態(tài)特征與水霉屬水霉的形態(tài)基本相似。
　　2.此SN菌株的ITS rDNA序列與GenBank中水霉屬鮭水霉(GenBank登錄號(hào)為EU551152)的親緣關(guān)系最接近。因此，推斷菌株SN為鮭水霉（Saprolegnia salmonis），GenBan

4、k登錄號(hào)為KJ579137。
　　3.通過(guò)將山女鱒魚(yú)卵暴露于不同濃度的SN孢子懸液中，研究SN菌株的感染率，發(fā)現(xiàn)魚(yú)卵感染水霉病主要是通過(guò)水體中的孢子侵染導(dǎo)致的。孢子附著在魚(yú)卵上，并可在魚(yú)卵之間傳播;且水霉病的感染率均隨著養(yǎng)殖水體中孢子濃度的增加而升高，當(dāng)初始濃度為1×105個(gè)/ml時(shí)，感染率最高達(dá)到82％，并且高濃度組與低濃度組之間差異顯著。
　　4.通過(guò)在不同條件下對(duì)菌株SN的生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)，適宜菌株SN生長(zhǎng)的溫度范

5、圍為10～30℃，適宜生長(zhǎng)的pH范圍在5～11;最適生長(zhǎng)溫度為25℃，最適生長(zhǎng)pH為8;菌株SN對(duì)NaCl較為敏感，在鹽度范圍為0.5％～2％內(nèi)菌株雖可生長(zhǎng)，但是隨著鹽度的升高菌株的生長(zhǎng)明顯受到抑制。
　　5.本實(shí)驗(yàn)選用過(guò)氧化氫、甲醛、孔雀石綠、檢科Ⅰ號(hào)等6種抗水霉制劑對(duì)水霉菌株SN孢子生長(zhǎng)的影響進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)高濃度的各抗水霉制劑對(duì)SN抑制率高;并且過(guò)氧化氫和甲醛抑孢子的效果優(yōu)于孔雀石綠，而檢科Ⅰ號(hào)、亞硝酸鈉和過(guò)氧乙酸的抑制效果不