二亞油酰磷脂的制備.pdf

1、二亞油酰磷脂，一類對(duì)肝臟具有特殊保護(hù)功能的磷脂，在護(hù)肝藥領(lǐng)域的應(yīng)用得到了醫(yī)學(xué)專家們的一致認(rèn)可。本論文旨在探索一種制備二亞油酰磷脂的工藝，課題的價(jià)值不僅在于制備了一種對(duì)肝臟疾病的具有特殊療效的物質(zhì)，同時(shí)也為制備高純度二亞油酰磷脂酰膽堿提供了優(yōu)質(zhì)原料。 以紅花油為原料，采用皂化--酸化--尿素包合法自制質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.32％的高純度亞油酸。根據(jù)文獻(xiàn)資料，選擇底物摩爾比Sr(亞油酸/磷脂，mol/mol)，加酶量Ld(酶/底物，m/m)

2、，反應(yīng)溫度Te，反應(yīng)時(shí)間Ti和加水量Wd(水/酶，m/m)等5個(gè)影響因素。無溶劑體系，在脂肪酶TLIM的催化條件下，分別研究了以紅花油和自制高純亞油酸為原料制備二亞油酰磷脂的工藝。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)和響應(yīng)面分析試驗(yàn)優(yōu)化了相應(yīng)的反應(yīng)條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：以紅花油為原料的工藝，在sr8:1，Ld26％，Wd12％，Te70℃，Ti24h條件下，產(chǎn)品的亞油酸為72.28％。而以亞油酸為原料的制備工藝得到的產(chǎn)品，其亞油酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)

3、到了83.56％。因此確定最佳的制備工藝條件為：無溶劑體系，LipaseTLIM在Sr8.52:1，Ti55.65h，Te56.88℃，Ld29.37％條件下催化亞油酸與磷脂的酯交換反應(yīng)。 為了指導(dǎo)工業(yè)化生產(chǎn)，對(duì)亞油酸與磷脂的酶促酯交換反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)和熱力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。首先建立了一種滿足動(dòng)力學(xué)研究要求的準(zhǔn)確定量磷脂中亞油酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的方法--氣相內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法，方法學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)顯示：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為2.15％<5％，平均回收

4、率在95.6％-104.7％之間，方法的線性范圍是1μg/μL-20μg/μL。建立了酯交換反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)模型，并經(jīng)過理論值與實(shí)驗(yàn)值的比較驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)磷脂與亞油酸的酯交換反應(yīng)符合雙底物酶催化的乒乓機(jī)制，其反應(yīng)活化能為14.17kJ/mol，不同溫度下的反應(yīng)級(jí)數(shù)在1.3705～1.8244范圍內(nèi)，屬于準(zhǔn)二級(jí)反應(yīng)。 對(duì)產(chǎn)品的理化指標(biāo)過氧化值(POV)、碘值(TV)、酸價(jià)(AV)、水分和丙酮不溶物等進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品的POV、水分和丙酮

5、不溶物指標(biāo)與原料磷脂相比無顯著變化，只是AV減小，IV增大。產(chǎn)品中的丙酮?dú)埩袅繛?2.24μg/g<50μg/g，符合SB/T10206-1994磷脂通用技術(shù)條件的要求。產(chǎn)品主要由PC和PE兩種磷脂組成，PC是其主要的磷脂種類，包含了6個(gè)分子種，分別是：18:3/18:3-PC，18:2/18:3-PC，18:2/18:2-PC，16:0/18:2-PC，18:1/18:2-PC，18:0/18:2-PC，其中18:2/18:2-PC在