綠原酸緩解大鼠腸道線粒體氧化損傷.pdf

1、隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展、生活方式和膳食結(jié)構(gòu)的巨大變化,代謝綜合征(如高血脂癥、糖尿病、心血管病)的發(fā)生率越來越高,嚴(yán)重危害人類健康。線粒體是機(jī)體細(xì)胞內(nèi)能量代謝和自由基產(chǎn)生的主要場所,一旦代謝過程或自由基增減平衡被破壞,就會(huì)危害機(jī)體并產(chǎn)生疾病。研究表明線粒體功能障礙是引起慢性代謝疾病重要的病理基礎(chǔ),如糖尿病、衰老、心血管疾病和癌癥等,因此,提高線粒體質(zhì)量,降低線粒體損傷,從而抑制自由基的產(chǎn)生是緩解慢性代謝疾病的重要途徑之一。本文通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)

2、驗(yàn),在大鼠腸道線粒體水平上,探討綠原酸對氧化損傷線粒體的保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　本文第一部分探討綠原酸在體外對大鼠腸道線粒體氧化損傷的保護(hù)作用。
　　方法:不同濃度的 H2O2損傷線粒體,測定線粒體腫脹度、膜電位和 ROS,確定H2O2最適濃度;不同濃度的CHA加入線粒體懸液,測定線粒體腫脹、膜電位和 ROS,確定 CHA最適濃度。試驗(yàn)分四組:正常組、H2O2組、160μmol/LCHA+H2O2組、160μmol/LCH

3、A組。測定線粒體懸液及上清液中細(xì)胞色素C、8-OHdG含量、T-SOD、GSH-Px、T-AOC及復(fù)合物I、IV和 V活性。
　　結(jié)果:
　　(1)H2O2的最適濃度為0.5mol/L;
　　(2)CHA的最適濃度為160μmol/L;
　　(3)160μmol/LCHA+H2O2組的線粒體懸液細(xì)胞色素C含量比H2O2組顯著增多(P<0.05);
　　(4)160μmol/LCHA+H2O2組中8-OHdG

4、的量比 H2O2組顯著降低(P<0.05);
　　(5)與 H2O2組比,160μmol/LCHA+H2O2組 T-SOD、GSH-Px活性顯著增強(qiáng)(P<0.05),T-AOC增強(qiáng)且具有極顯著性(P<0.01);
　　(6)與H2O2組比,160μmol/LCHA+H2O2組線粒體復(fù)合物I、IV和V活性增加且具有極顯著性差異(P<0.01)。
　　本文第二部分探討綠原酸在體內(nèi)對大鼠腸道線粒體損傷的保護(hù)作用。
　　

5、方法:選用32只健康大鼠(180±20)g,隨機(jī)分成四組:正常組、TNBS組、CHA組、CHA+TNBS組,每組8只,實(shí)驗(yàn)期四周,TNBS劑量為100mg/Kg,綠原酸每日經(jīng)口灌胃,劑量為60mg/Kg。本部分做了腸道形態(tài)學(xué)觀察,組織學(xué)評分,測定回、結(jié)腸T-SOD、T-AOC活性,MDA含量,電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu),測定線粒體懸液及上清液細(xì)胞色素C含量,8-OHdG含量,T-SOD活性,MDA含量,復(fù)合物I、IV和 V活性。
　　結(jié)果

6、:
　　(1) HE染色顯示CHA+TNBS組腸道絨毛結(jié)構(gòu)比TNBS組完整,組織評分圖顯示兩組具有顯著性差異(P<0.05);
　　(2)CHA+TNBS組回、結(jié)腸T-SOD活性、T-AOC能力高于 TNBS組,且 T-SOD活性出現(xiàn)顯著性(P<0.05);與CHA+TNBS組比,MDA含量在TNBS組升高,且有顯著性(P<0.05);
　　(3)TNBS組電鏡圖顯示線粒體膜破裂,脊斷裂或消失,線粒體基質(zhì)減少且模糊不清

7、晰,線粒體體積變大變圓發(fā)生腫脹,在 CHA+TNBS組損傷癥狀得到緩解;
　　(4)與TNBS組比,CHA+TNBS組線粒體懸液細(xì)胞色素C含量增加;
　　(5)CHA+TNBS組復(fù)合物 I, IV和 V活性高于 TNBS組,且復(fù)合物 I和 V具有顯著性差異(P<0.05)。
　　綜上所述,綠原酸對大鼠腸道線粒體的損傷具有緩解作用。在體外,綠原酸對線粒體復(fù)合物I, IV和V具有保護(hù)作用;在大鼠體內(nèi),綠原酸對損傷的腸道組織