綠原酸對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究綠原酸(chlorogenic acid,CGA)對(duì)過(guò)氧化氫(Hydrogen peroxide)處理的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(ARPE-19)細(xì)胞抗氧化損傷的保護(hù)作用,為將來(lái)臨床上利用綠原酸治療老年黃斑變性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:過(guò)氧化氫(H2O2)以濃度和時(shí)間梯度作用于ARPE-19,通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性,建立 ARPE-19細(xì)胞氧化損傷模型。采用 MTT法檢測(cè) CGA對(duì)ARPE-19細(xì)胞的增殖及毒性作用。實(shí)驗(yàn)分

2、3組:正常對(duì)照組,H2O2模型組, CGA+H2O2干預(yù)組。應(yīng)用紫外分光光度計(jì)法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的變化;Hoechst33258染色及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:1.H2O2以濃度和時(shí)間梯度誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞凋亡,建立氧化損傷模型適宜條件為500μmol/L的 H2O2作用HRPE細(xì)胞24h。2.綠原酸各濃度組ARPE-19細(xì)胞活性與空白對(duì)照組比較,差

3、異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;綠原酸各濃度干預(yù)組細(xì)胞活性較H2O2模型組高,在CGA濃度為100μmol/L,活性最高,選此濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.與正常對(duì)照組相比,H2O2模型組SOD活性、GSH含量下降, MDA含量增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與H2O2模型組相比, CGA干預(yù)組的 SOD活性及 GSH含量均升高,MDA含量下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4.與正常對(duì)照組比較,H2O2模型組的凋亡率顯著增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義