芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術醇對人胃癌細胞MGC-803抑制作用的研究.pdf

1、目的和意義：
　　 胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，是嚴重威脅人民健康的疾病。尋找有效治療胃癌的藥物和方法是目前最迫切的研究課題。研究表明胃癌的發(fā)生是一個多階段、多因素的復雜發(fā)展過程，其發(fā)生和發(fā)展不僅與增殖和分化異常有關，而且與細胞凋亡基因和蛋白的調(diào)節(jié)機制紊亂有關。探索誘導胃癌細胞凋亡的策略成為近年來研究的重點。中醫(yī)藥療法是胃癌治療領域中的重要部分，中藥對于降低胃癌術后復發(fā)率、減輕放化療不良反應、延長患者生存期、改善患者的生存質(zhì)

2、量有著重要的意義。南京中醫(yī)藥大學單兆偉教授治療胃腸道腫瘤的驗方芪竹方，臨床研究發(fā)現(xiàn)該方具有較好的抑制腫瘤生長、減少術后復發(fā)作用，但其作用機理尚未完全明確。我們選取芪竹方中滋陰養(yǎng)胃的扶正主藥玉竹，破血散結的抗癌主藥莪術。通過研究兩藥的主要有效成分薯蕷皂苷與莪術醇對人胃癌細胞MGC-803的體外抑制作用及機制，探索芪竹方抑制胃癌的作用機制，分離活性單體，為新型抗癌藥物的研發(fā)提供新的策略和思路。
　　 研究方法：
　　 體外培

3、養(yǎng)人胃癌細胞MGC-803。通過MTT法觀察芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術醇對MGC-803增殖抑制作用，并考量其量效和時效關系；光鏡和電鏡下觀察藥物作用后，細胞形態(tài)學變化；分光光度法檢測芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術醇對MGC-803細胞Caspase-9表達的影響；RT-PCR法檢測薯蕷皂苷及莪術醇對MGC-803細胞端粒酶活性的影響。
　　 結果：
　　 1．薯蕷皂苷呈劑量和時間依賴性地抑制MGC-803細胞增殖，24hI

4、C50為8.15μg/ml,48hIC50為4.05pg/ml;莪術醇對MCC-803細胞抑制作用表現(xiàn)明顯的時-效和量-效關系，24hIC50為151.45μg/ml,48hIC50為102.50μg/ml.
　　 2．MGC-803細胞具有典型的腫瘤細胞形態(tài)和超微結構特征；薯蕷皂苷、莪術醇及兩者配伍作用MGC-803細胞后，細胞均表現(xiàn)典型的凋亡改變：微絨毛結構減少甚至消失，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)凝聚、邊集，核固縮，裂解，凋亡小體形成

5、等。
　　 3．薯蕷皂苷及莪術醇均能提高MGC-803細胞Caspase-9活性，活化作用表現(xiàn)濃度依賴性。
　　 4．薯蕷皂苷及莪術醇均能抑制MGC-803細胞端粒酶活性，抑制作用表現(xiàn)量-效關系。
　　 5．薯蕷皂苷與莪術醇配伍使用，在對MGC-803細胞增殖抑制、活化Caspase-9及抑制端粒酶活性等方面表現(xiàn)出較單藥使用更強的效用。
　　 結論：
　　 薯蕷皂苷、莪術醇是芪竹方的有效活性成分；