芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術(shù)醇對(duì)人胃癌細(xì)胞MGC-803抑制作用的研究.pdf

1、目的和意義：
　　 胃癌是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，是嚴(yán)重威脅人民健康的疾病。尋找有效治療胃癌的藥物和方法是目前最迫切的研究課題。研究表明胃癌的發(fā)生是一個(gè)多階段、多因素的復(fù)雜發(fā)展過(guò)程，其發(fā)生和發(fā)展不僅與增殖和分化異常有關(guān)，而且與細(xì)胞凋亡基因和蛋白的調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂有關(guān)。探索誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡的策略成為近年來(lái)研究的重點(diǎn)。中醫(yī)藥療法是胃癌治療領(lǐng)域中的重要部分，中藥對(duì)于降低胃癌術(shù)后復(fù)發(fā)率、減輕放化療不良反應(yīng)、延長(zhǎng)患者生存期、改善患者的生存質(zhì)

2、量有著重要的意義。南京中醫(yī)藥大學(xué)單兆偉教授治療胃腸道腫瘤的驗(yàn)方芪竹方，臨床研究發(fā)現(xiàn)該方具有較好的抑制腫瘤生長(zhǎng)、減少術(shù)后復(fù)發(fā)作用，但其作用機(jī)理尚未完全明確。我們選取芪竹方中滋陰養(yǎng)胃的扶正主藥玉竹，破血散結(jié)的抗癌主藥莪術(shù)。通過(guò)研究?jī)伤幍闹饕行С煞质硎氃碥张c莪術(shù)醇對(duì)人胃癌細(xì)胞MGC-803的體外抑制作用及機(jī)制，探索芪竹方抑制胃癌的作用機(jī)制，分離活性單體，為新型抗癌藥物的研發(fā)提供新的策略和思路。
　　 研究方法：
　　 體外培

3、養(yǎng)人胃癌細(xì)胞MGC-803。通過(guò)MTT法觀察芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術(shù)醇對(duì)MGC-803增殖抑制作用，并考量其量效和時(shí)效關(guān)系；光鏡和電鏡下觀察藥物作用后，細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；分光光度法檢測(cè)芪竹方中單體薯蕷皂苷及莪術(shù)醇對(duì)MGC-803細(xì)胞Caspase-9表達(dá)的影響；RT-PCR法檢測(cè)薯蕷皂苷及莪術(shù)醇對(duì)MGC-803細(xì)胞端粒酶活性的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1．薯蕷皂苷呈劑量和時(shí)間依賴性地抑制MGC-803細(xì)胞增殖，24hI

4、C50為8.15μg/ml,48hIC50為4.05pg/ml;莪術(shù)醇對(duì)MCC-803細(xì)胞抑制作用表現(xiàn)明顯的時(shí)-效和量-效關(guān)系，24hIC50為151.45μg/ml,48hIC50為102.50μg/ml.
　　 2．MGC-803細(xì)胞具有典型的腫瘤細(xì)胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)特征；薯蕷皂苷、莪術(shù)醇及兩者配伍作用MGC-803細(xì)胞后，細(xì)胞均表現(xiàn)典型的凋亡改變：微絨毛結(jié)構(gòu)減少甚至消失，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)凝聚、邊集，核固縮，裂解，凋亡小體形成

5、等。
　　 3．薯蕷皂苷及莪術(shù)醇均能提高M(jìn)GC-803細(xì)胞Caspase-9活性，活化作用表現(xiàn)濃度依賴性。
　　 4．薯蕷皂苷及莪術(shù)醇均能抑制MGC-803細(xì)胞端粒酶活性，抑制作用表現(xiàn)量-效關(guān)系。
　　 5．薯蕷皂苷與莪術(shù)醇配伍使用，在對(duì)MGC-803細(xì)胞增殖抑制、活化Caspase-9及抑制端粒酶活性等方面表現(xiàn)出較單藥使用更強(qiáng)的效用。
　　 結(jié)論：
　　 薯蕷皂苷、莪術(shù)醇是芪竹方的有效活性成分；