青藤堿對胃癌MGC803細(xì)胞增殖的抑制作用及機(jī)制探討.pdf

1、【目的】
　　研究青藤堿對胃癌MGC803細(xì)胞增殖的抑制作用并探討其相關(guān)機(jī)制。
　　【方法】
　　1.體外培養(yǎng)MGC803細(xì)胞，將其分為五組：對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml)，加入藥物后培養(yǎng)細(xì)胞24、48、72小時，CCK8法檢測其OD值，并計算出其對細(xì)胞的抑制率。
　　2.體外培養(yǎng)MGC803細(xì)胞，將其分為五組：對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml)，加入藥

2、物后培養(yǎng)細(xì)胞48小時，F(xiàn)CM檢測細(xì)胞周期，Western blot檢測p21蛋白表達(dá)。
　　3.體外培養(yǎng)MGC803細(xì)胞，將其分為五組：對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml)，加入藥物后培養(yǎng)細(xì)胞48小時，F(xiàn)CM檢測細(xì)胞凋亡，Western blot檢測線粒體和胞漿 Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型 Caspase-3、Survivn蛋白表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　　1.1、青藤堿對胃癌MGC8

3、03細(xì)胞的抑制率
　　SIN組(300、600、900、1200μg/mL)24小時抑制率分別為（2.25±0.45、7.71±1.70、15.42±3.95、35.75±2.61）％，其中SIN組(600、900、1200ug/mL)高于對照組（P<0.05），SIN組(300ug/ml)無明顯差異（P>0.05）；SIN組(300、600、900、1200μg/mL)48小時抑制率分別為(10.36±2.82、18.02±1.

4、01、24.36±2.65、40.59±3.18)%，高于對照組(P<0.05)；SIN組(300、600、900、1200μg/mL)72小時抑制率分別為(19.57±1.36、26.31±3.34、44.00±3.96、53.25±5.51)%，高于對照組(P<0.05)。
　　2.1、青藤堿對細(xì)胞周期影響
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml) G1期比率分別為（70.39±0.31、69.22±0

5、.36、83.35±4.02、87.15±2.82）%，高于對照組（61.13±1.22）%(P<0.05)；S期比率分別為（20.03±2.22、17.65±1.82、9.87±1.26、9.33±0.82）%，低于對照組（26.46±1.02）%；G2/M期比率分別為（9.57±0.68、8.03±1.06、6.78±1.07、3.52±0.92）%，低于對照組（12.41±1.45）%。
　　2.2、青藤堿對p21蛋白表達(dá)影

6、響
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml)p21蛋白表達(dá)水平分別為(1806±111.70、2610±130.00、2923±150.44、3717±155.03)INT×mm，高于對照組(1573±61.10) INT×mm(P<0.05)
　　3.1、青藤堿對細(xì)胞凋亡影響
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml)凋亡率分別為（2.49±0.51、4.25±0.67、10.35±

7、1.61、12.82±1.41）%，高于對照組（0.12±0.03）%(P<0.05)。
　　3.2、青藤堿對線粒體和胞漿Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型Caspase-3、Survivn蛋白及Bax/Bcl-2比值表達(dá)影響
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml)胞漿 Cyt C蛋白表達(dá)水平分別為(965±47.69、951±73.67、1600±75.50、2136±65.06)INT× mm，高

8、于對照組(633±67.89) INT×mm(P<0.05)；線粒體CytC蛋白表達(dá)水平分別為(981±33.49、831±32.70、644±78.14、660±98.49)INT×mm，低于對照組(1623±135.77) INT× mm(P<0.05)；
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml)Bax蛋白表達(dá)水平分別為(1314±60.89、1757±70.24、2286±135.0、2557±84.54)

9、INT×mm，高于對照組(794±53.78) INT× mm(P<0.05)； Bcl-2蛋白表達(dá)水平分別為(2150±105.36、1640±105.35、1009±29.57、714±73.50)INT×mm，其中SIN組(600、900、1200ug/ml)低于對照組(2153±70.50) INT×mm(P<0.05)，SIN組(300ug/mL)無明顯差異（P>0.05）；Bax/Bcl-2比值分別為（0.62±0.05、1

10、.07±0.09、2.27±0.07、3.58±0.25），高于對照組（0.37±0.03）（P<0.05）
　　SIN組(300、600、900、1200ug/ml)裂解型Caspase-3蛋白表達(dá)水平分別為(2075±155.93、2523±116.76、3605±168.84、4015±132.57)INT×mm，高于對照組(1621±38.50) INT×mm(P<0.05)；Survivn蛋白表達(dá)水平分別為（2313±1

11、23.42、1857±150.11、1167±150.44、582±151.19）INT×mm，低于對照組（2990±160.93）INT×mm(P<0.05)。
　　【結(jié)論】
　　1.青藤堿能夠顯著抑制胃癌MGC803細(xì)胞增殖。
　　2.青藤堿抑制胃癌MGC803細(xì)胞增殖與其阻滯細(xì)胞G1期有關(guān)，其阻滯作用與上調(diào)p21蛋白表達(dá)有關(guān)。
　　3.青藤堿抑制胃癌MGC803細(xì)胞增殖與其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)，其誘導(dǎo)作用與促進(jìn)