漳州水仙鱗莖盤轉錄組分析及類黃酮合成途徑基因的表達.pdf

1、中國水仙（Narcissus tazetta var. chinensis）為石蒜科水仙屬多花水仙類的多年生草本植物，水仙品種較少，顏色單一，改良中國水仙花色一直以來都是廣大研究者對水仙的研究重點之一。本研究以漳州水仙為材料，通過對不同器官色素顯色分析及原花青素定性分析、水仙鱗莖盤轉錄組測序以及qPCR分析類黃酮合成途徑結構基因和調控因子的表達，探討漳州水仙類黃酮途徑不同分支的生物合成及其分子基礎。本研究主要獲得以下研究成果：
　

2、　1.漳州水仙中的主要類黃酮物質為黃酮醇和原花青素。水仙花瓣和副冠部位主要成分是黃酮醇，鱗莖盤中主要成分原花青素，且原花青素單體為兒茶素。水仙花瓣和副冠中沒有檢測到原花青素和花青素，這可能是導致水仙花顏色單一的主要原因之一。
　　2.以水仙鱗莖盤為材料，提取RNA，基于Illumina平臺進行轉錄組測序，此次測序共獲得4,934,557,168bp數據量，其中reads數24,430,849條。組裝出36,006個unigene，

3、 unigene平均讀長706bp，N50讀長1,084，超過500的的unigene有16,059個，從而構建了水仙鱗莖盤轉錄組數據庫。
　　3.通過Blast數據庫比對、序列分析、系統進化樹等方法，篩選和確認漳州水仙中類黃酮生物合成相關的結構基因和調控因子，共獲得4個NtCHS、2個NtCHI、3個NtF3H、3個NtUFGT、2個NtMYB以及NtF3’H、NtDFR、NtLAR、NtbHLH和NtWD40各一個基因，在數據

4、庫中，沒有發(fā)現原花青素途徑關鍵基因ANR及花青素途徑關鍵基因ANS。
　　4.通過qPCR技術對水仙鱗莖盤轉錄組數據庫中刪選得到的類黃酮合成相關10個基因的共19個家族成員在漳州水仙全開期、半開期和花蕾期三個時期的花瓣與副冠以及葉片和鱗莖盤中的表達模式進行分析，結果發(fā)現，含有多個基因的家族基因都表現出不同的表達模式；NtLAR在水仙鱗莖盤部位高表達，NtFLS在水仙花瓣與副冠中高表達，與這兩部分器官中類黃酮的成分相吻合；NtMYB