LY-EC誘導肝細胞毒性的體外試驗研究.pdf

1、目的：在體外試驗系統(tǒng)，探討瀏陽霉素乳劑(Liuyangmycinemulsifiable concentrate，LY-EC)對L-02肝細胞抗氧化系統(tǒng)及線粒體能量代謝的影響，為進一步研究瀏陽霉素肝損害的毒性機制奠定實驗基礎。 方法：用L-02肝細胞為受試細胞，通過MTT試驗檢測LY-EC對L-02肝細胞存活率的影響，在>60﹪細胞存活率的濃度下設置6個試驗組即100mg/L、25mg/L、6.25mg/L、1.56mg/L、0

2、.39mg/L LY-EC處理組和1個對照組，LY-EC處理細胞時間為12h。用化學比色法測定谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、肝細胞線粒體琥珀酸脫氫(SDH)、細胞膜ATP酶、谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶(GST)活性和線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔(PTP)開放度；用高效液相色譜法檢測不同濃度LY-EC對肝細胞中腺苷酸(ATP，ADP，AMP)含量的影響，并分析ATP/ADP比值以及負荷能量(EC)的變化；電鏡觀察高、

3、中濃度LY-EC對線粒體超微結(jié)構的影響。 結(jié)果：在100mg/L-0.39mg/L處理濃度范圍，LY-EC對L-02肝細胞具有明顯細胞毒性，其細胞存活指數(shù)與LY-EC處理濃度呈負明顯相關(r=-0.939)。LY-EC處理的肝細胞與對照組比較，其細胞SOD、SDH、ATP酶與GST活性顯著降低(P<0.05)，線粒體PTP開放度與MDA含量明顯增加(P<0.05)，并觀察到明顯的濃度．效應關系。染毒組肝細胞內(nèi)GSH、總腺苷酸含量