糖皮質(zhì)激素對哮喘豚鼠模型Eotaxin、CCR3和IL-5作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察哮喘豚鼠外周血、肺和骨髓組織EOS百分比和肺組織Eotaxin、CCR3和IL-5的表達(dá)及激素對其影響，探討在氣道-骨髓-循環(huán)-氣道是否存在著調(diào)控EOS定向遷移的信號環(huán)路及激素干預(yù)的機(jī)制。 方法 1.健康雄性豚鼠40只，以卵白蛋白(OVA)致敏和激發(fā)制作哮喘模型，隨機(jī)分為正常組(A組)、哮喘組(B組)、地塞米松干預(yù)組(C組)、布地奈德干預(yù)組(D組)，每組10只，在末次激發(fā)6小時(shí)后處死豚鼠； 2.取豚鼠頸

2、動脈血、骨髓和肺組織，分別制備血涂片、骨髓涂片和肺組織切片； 3.外周血和骨髓涂片用Wright染色，光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)和EOS百分比； 4.肺組織切片HE染色，光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)和EOS百分比； 5.肺組織切片用Eotaxin、CCR3和IL-5多克隆抗體免疫組化染色，光學(xué)顯微鏡下分別計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞百分比； 6.用免疫印跡法測定肺組織中Eotaxin蛋白表達(dá)變化。 結(jié)果 1.豚

3、鼠外周血、骨髓和肺組織中EOS百分比分別為：A組為(1.33±0.52)％、(1.17±0.41)％、(1.67±0.52)％；B組為(4.83±0.98)％、(3.17±0.75)％、(4.00±0.89)％；C組為(2.68±1.03)％、(1.67±0.82)％、(2.83±0.75)％；D組為(2.67±0.52)％、(1.83±0.75)％、(2.67±0.52)％；B組與A、C、D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，A組

4、與C、D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C組與D組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但C組較D組降低骨髓EOS百分比似乎更明顯； 2.豚鼠肺組織Eotaxin、CCR3和IL-5多克隆抗體免疫組化染色陽性細(xì)胞百分比分別為： A組為(2.29±0.35)％、(2.07±0.15)％、(1.92±0.09)％；B組為(3.27±0.42)％、(3.66±0.47)％、(3.03±0.33)％；C組為(2.80±0.22)

5、％、(2.98±0.45)％、(2.54±0.32)％：D組為(2.75±0.31)％、(2.65±0.25)％、(2.32±0.12)％；B組與A、C、D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，A組與C、D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C組與D組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)； 3.免疫印跡法檢測發(fā)現(xiàn)豚鼠肺組織Eotaxin在A、B、C、D組表達(dá)量分別為0.447±0.026、0.836±0.012、0.639

6、±0.034、0.668±0.023，B組表達(dá)較A、C和D組明顯升高(P<0.01)，C組與D組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但仍高于A組(P<0.05)； 4. 相關(guān)性分析結(jié)果提示哮喘豚鼠肺組織中EOS百分比和Eotaxin、CCR3和IL-5在肺組織的表達(dá)皆呈正相關(guān)(r=0.852，P<0.001)、(r=0.671，P<0.001)、(r=0.663，P<0.001)。 結(jié)論： 1.哮喘豚鼠外周血、