淋巴細(xì)胞趨化因子在大鼠白色念珠菌肺炎中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:檢測淋巴細(xì)胞趨化因子(Lymphotactin,Ltn)在不同感染時(shí)期的大鼠白色念珠菌肺炎組及健康對(duì)照組血清的表達(dá)水平,同步測定血清中γ-干擾素(Interferon-gama,IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(Interleukin-2,Ⅱ-2)、白細(xì)胞介素-4(Interleukin-4,Ⅱ-4)、白細(xì)胞介-10(Interleukin-10,Ⅱ-10)含量變化,比較淋巴細(xì)胞趨化因子和IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10在不

2、同感染時(shí)期的大鼠白色念珠菌肺炎組及健康對(duì)照組表達(dá)差異性,分析大鼠白色念珠菌肺炎血清淋巴細(xì)胞趨化因子表達(dá)特點(diǎn)及和這些細(xì)胞因子之間的關(guān)系,探討在大鼠白色念珠菌肺炎發(fā)展變化過程中可能起到的作用及其意義。 方法:選用清潔級(jí)健康雄性SD大鼠(150g-180g,鼠齡30-40d)80只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組,各組40只。每組又隨機(jī)分為1d、3d、7d、11d四個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)10只。實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射氯胺酮(100mg/Kg體重)麻

3、醉后,從氣管注入白色念珠菌液0.4ml(每0.1ml約106CFU/ml),制備白色念珠菌肺炎模型,各組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在無菌操作下腹腔注射氯胺酮麻醉后將大鼠左肺取下,取1cm×1cm組織塊無菌條件下剪碎,置入沙保培養(yǎng)基,35℃下培養(yǎng)48小時(shí),計(jì)數(shù)白色念珠菌菌落數(shù),右肺組織石蠟包埋切片HE染色觀察病理改變,進(jìn)行評(píng)分,同時(shí)心室腔穿刺抽血,離心后取血清,采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定血清Ltn水平,同步用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定I

4、FN-γ、IL-2、IL-4、IL-10濃度。應(yīng)用SPSSl3.O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與圖表繪制,采用樣本均數(shù)檢驗(yàn)和直線相關(guān)分析等方法對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行處理。 結(jié)果: 1、肺組織病理學(xué)改變:對(duì)照組鏡下沒有明顯病理改變,模型組肺泡炎明顯,鏡下見肺泡間隔增厚,血管擴(kuò)張,充血出血,肺泡腔及肺泡間隔可見較多炎癥細(xì)胞浸潤,部分區(qū)域可見肺泡斷裂融合,1d、3d、7d、11dSzapiel評(píng)分分別為1.70±0.48,3.60±0.70

5、,2.90±0.57,1.300±0.52(分)(3d>7d>1d>11d)(P<0.05)。 2、肺組織真菌培養(yǎng):正常對(duì)照組無白色念珠菌生長,模型1d、3d、7d、11d組真菌培養(yǎng)48H后可見白色念珠菌生長,分別計(jì)數(shù)為3.50±1.08,4.60±1.08,1.30±0.48,0.10±0.32(106CFU/mL)(3d>1d>7d>11d)(P<0.05)。 3、Ltn濃度測定:模型1d、3d、7d組Ltn值較同期

6、對(duì)照組增高,存在顯著性差異(P<0.05),濃度高峰在3d組,11d組與對(duì)照組比較沒有差異(P>0.05)。 4、IFN-γ、IL-2、IL-4、 IL-10濃度測定:與同期對(duì)照組比較,模型組IFN-γ、IL-2含量1d、3d、7d組增高,存在明顯差異(P<0.05),11d組無差異(P>0.05),濃度高峰在3d,模型組IL-4、IL-10含量3d,7d組增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),1d組、11d組無差異(P>0.05

7、),濃度高峰在7d組。 5、相關(guān)性分析:模型組Ltn含量變化與肺部炎性改變、菌落計(jì)數(shù)呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.816、0.647(P<0.05),與血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10濃度變化都呈正相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)分別為0.823、0.846、0.580、0.532,均P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: ①Ltn表達(dá)強(qiáng)度的消長與肺部炎癥相關(guān),它參與了真菌感染過程,可能起著清除病原體的積極作用。

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