淋巴細(xì)胞趨化因子在大鼠白色念珠菌肺炎中的作用研究.pdf

1、目的：檢測淋巴細(xì)胞趨化因子(Lymphotactin，Ltn)在不同感染時(shí)期的大鼠白色念珠菌肺炎組及健康對(duì)照組血清的表達(dá)水平，同步測定血清中γ-干擾素(Interferon-gama，IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(Interleukin-2,Ⅱ-2)、白細(xì)胞介素-4(Interleukin-4,Ⅱ-4)、白細(xì)胞介-10(Interleukin-10,Ⅱ-10)含量變化，比較淋巴細(xì)胞趨化因子和IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10在不

2、同感染時(shí)期的大鼠白色念珠菌肺炎組及健康對(duì)照組表達(dá)差異性，分析大鼠白色念珠菌肺炎血清淋巴細(xì)胞趨化因子表達(dá)特點(diǎn)及和這些細(xì)胞因子之間的關(guān)系，探討在大鼠白色念珠菌肺炎發(fā)展變化過程中可能起到的作用及其意義。 方法：選用清潔級(jí)健康雄性SD大鼠(150g-180g，鼠齡30-40d)80只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，各組40只。每組又隨機(jī)分為1d、3d、7d、11d四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)10只。實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射氯胺酮(100mg/Kg體重)麻

3、醉后，從氣管注入白色念珠菌液0.4ml(每0.1ml約106CFU/ml)，制備白色念珠菌肺炎模型，各組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在無菌操作下腹腔注射氯胺酮麻醉后將大鼠左肺取下，取1cm×1cm組織塊無菌條件下剪碎，置入沙保培養(yǎng)基，35℃下培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)白色念珠菌菌落數(shù)，右肺組織石蠟包埋切片HE染色觀察病理改變，進(jìn)行評(píng)分，同時(shí)心室腔穿刺抽血，離心后取血清，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定血清Ltn水平，同步用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定I

4、FN-γ、IL-2、IL-4、IL-10濃度。應(yīng)用SPSSl3.O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與圖表繪制，采用樣本均數(shù)檢驗(yàn)和直線相關(guān)分析等方法對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行處理。 結(jié)果： 1、肺組織病理學(xué)改變：對(duì)照組鏡下沒有明顯病理改變，模型組肺泡炎明顯，鏡下見肺泡間隔增厚，血管擴(kuò)張，充血出血，肺泡腔及肺泡間隔可見較多炎癥細(xì)胞浸潤，部分區(qū)域可見肺泡斷裂融合，1d、3d、7d、11dSzapiel評(píng)分分別為1.70±0.48,3.60±0.70

5、,2.90±0.57，1.300±0.52(分)(3d＞7d＞1d＞11d)(P＜0.05)。 2、肺組織真菌培養(yǎng)：正常對(duì)照組無白色念珠菌生長，模型1d、3d、7d、11d組真菌培養(yǎng)48H后可見白色念珠菌生長，分別計(jì)數(shù)為3.50±1.08，4.60±1.08，1.30±0.48，0.10±0.32(106CFU/mL)(3d＞1d＞7d＞11d)(P＜0.05)。 3、Ltn濃度測定：模型1d、3d、7d組Ltn值較同期

6、對(duì)照組增高，存在顯著性差異(P＜0.05)，濃度高峰在3d組，11d組與對(duì)照組比較沒有差異(P＞0.05)。 4、IFN-γ、IL-2、IL-4、 IL-10濃度測定：與同期對(duì)照組比較，模型組IFN-γ、IL-2含量1d、3d、7d組增高，存在明顯差異(P＜0.05)，11d組無差異(P＞0.05)，濃度高峰在3d，模型組IL-4、IL-10含量3d，7d組增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，1d組、11d組無差異(P＞0.05

7、)，濃度高峰在7d組。 5、相關(guān)性分析：模型組Ltn含量變化與肺部炎性改變、菌落計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.816、0.647(P＜0.05)，與血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10濃度變化都呈正相關(guān)性，其相關(guān)系數(shù)分別為0.823、0.846、0.580、0.532,均P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： ①Ltn表達(dá)強(qiáng)度的消長與肺部炎癥相關(guān)，它參與了真菌感染過程，可能起著清除病原體的積極作用。