過(guò)敏性猝死豚鼠IgE含量的死后變化規(guī)律及肥大細(xì)胞脫顆粒的觀察.pdf

1、目的：研究過(guò)敏性猝死豚鼠死后在4℃冷藏條件下血清IgE含量隨死后時(shí)間變化的規(guī)律，觀察過(guò)敏性猝死豚鼠肺組織內(nèi)IgE的免疫表達(dá)隨死后時(shí)間變化的規(guī)律，同時(shí)用組合染色方法顯示肥大細(xì)胞脫顆粒現(xiàn)象，并探討其在法醫(yī)學(xué)鑒定中的作用和意義，試圖為過(guò)敏性猝死的法醫(yī)學(xué)鑒定提供準(zhǔn)確、客觀的指標(biāo)。 方法：豚鼠64只，雌雄不限，體重200g左右，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組又分別分為死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組，每組8只豚

2、鼠。實(shí)驗(yàn)組采用多人混合血清注射液致敏豚鼠，建立過(guò)敏性休克死亡的動(dòng)物模型，取豚鼠血清及肺組織。(1)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)豚鼠血清IgE含量。(2)采用免疫組化ABC法對(duì)過(guò)敏性猝死豚鼠肺組織IgE進(jìn)行免疫組化染色，用BI2000病理圖像分析系統(tǒng)對(duì)組織切片進(jìn)行分析。(3)應(yīng)用俾士麥棕—碘綠—馬汀黃(BB-IG-MY)組合染色法顯示肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象。(4)數(shù)據(jù)的處理，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，兩因素方差分析。 結(jié)果：(1)實(shí)驗(yàn)組

3、豚鼠在被抗原再次攻擊后20s左右出現(xiàn)活動(dòng)減少，1min左右出現(xiàn)休克癥狀，2-5min死亡，死亡率100％。對(duì)照組豚鼠均未出現(xiàn)任何癥狀。(2)過(guò)敏性猝死豚鼠與對(duì)照組豚鼠血清IgE含量相比較，p＜0.001，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為過(guò)敏性猝死豚鼠血清IgE含量顯著升高；過(guò)敏性猝死豚鼠死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組血清IgE含量相比較，p＞0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，尚不能認(rèn)為過(guò)敏性猝死豚鼠死后在4℃冷藏條件下血清IgE含量在4

4、8小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間延長(zhǎng)有明顯的變化。(3)免疫組化染色結(jié)果表明，過(guò)敏性猝死豚鼠肺小血管壁及血管周圍均出現(xiàn)淺黃色或棕黃色顆粒，對(duì)照組豚鼠上述組織部位無(wú)淺黃色或棕黃色顆粒。過(guò)敏性猝死豚鼠死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組肺組織IgE平均分布密度相比較p＞0.05，說(shuō)明過(guò)敏性猝死豚鼠在4℃冷藏條件下肺組織IgE含量在死后48h內(nèi)無(wú)明顯變化。(4)組合染色法結(jié)果表明，肥大細(xì)胞胞質(zhì)顆粒呈棕色，細(xì)胞核成綠色，紅細(xì)胞呈黃色。過(guò)敏性猝死豚