雷公藤甲素影響人肺癌細(xì)胞Spc-A1的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)性質(zhì)及作用機(jī)制探討.pdf

1、本文研究了雷公藤甲素(triptolide)對(duì)人肺癌細(xì)胞株Spc-A1生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移相關(guān)性質(zhì)的影響，探討其作用機(jī)制，為雷公藤甲素的進(jìn)一步研究并開(kāi)發(fā)成為臨床抗腫瘤藥提供理論依據(jù)。 [方法]細(xì)胞生長(zhǎng)增殖抑制試驗(yàn)(MTT法)檢測(cè)雷公藤甲素對(duì)Spc-A1細(xì)胞的增殖抑制作用；Transwellchamber法檢測(cè)雷公藤甲素對(duì)Spc-A1細(xì)胞侵襲能力和趨化性運(yùn)動(dòng)能力的影響；細(xì)胞-基質(zhì)粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)雷公藤甲素對(duì)Spc-A1細(xì)胞粘附能力的影響；反轉(zhuǎn)錄

2、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)雷公藤甲素對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子信使核糖核酸(VEGFmRNA)表達(dá)的影響；Western印跡法(Westernblot)檢測(cè)雷公藤甲素對(duì)VEGF蛋白表達(dá)的影響。 [結(jié)果]雷公藤甲素對(duì)人肺癌細(xì)胞株Spc-A1細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖都具有一定程度的抑制作用：不同濃度的雷公藤甲素干預(yù)Spc-A1細(xì)胞24h、48h后，用MTT法測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可見(jiàn)藥物對(duì)Spc-A1細(xì)胞的增殖具有一定程度的抑制作用，

3、并且抑制率隨濃度(劑量)和時(shí)間的增加而增加；雷公藤甲素可抑制Spc-A1細(xì)胞體外侵襲及趨化性運(yùn)動(dòng)能力：20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml的雷公藤甲素作用于Spc-A1細(xì)胞6h后，細(xì)胞體外侵襲人工重組基底膜的能力和趨化性運(yùn)動(dòng)能力均降低，其抑制率分別為(14.92±2.99)％～(39.47±1.89)％和(19.71±3.36)％～(57.78±2.09)％；高濃度的雷公藤甲素可抑制Spc-A1細(xì)胞體外粘附能力：20ng/ml

4、、40ng/ml的雷公藤甲素在短時(shí)間(1h)內(nèi)對(duì)Spc-A1細(xì)胞粘附Matrigel的能力無(wú)明顯影響，80ng/ml的雷公藤甲素組與對(duì)照組相比，對(duì)Spc-A1細(xì)胞粘附Matrigel的能力差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，能明顯降低細(xì)胞的粘附能力，其抑制率為(14.86±5.98)％；雷公藤甲素可降低細(xì)胞分泌的VEGF活性，下調(diào)VEGF的表達(dá)：用RT-PCR方法檢測(cè)經(jīng)20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml的雷公藤甲素作用24h后的Spc-A1細(xì)

5、胞，結(jié)果顯示VEGFmRNA的表達(dá)明顯減少。用Westernblot方法檢測(cè)經(jīng)20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml的雷公藤甲素作用24h后的Spc-A1細(xì)胞，結(jié)果顯示VEGF的蛋白表達(dá)明顯減少。 [結(jié)論]雷公藤甲素能抑制人肺癌細(xì)胞Spc-A1的增殖、侵襲、運(yùn)動(dòng)及粘附能力，其作用機(jī)制與降低細(xì)胞分泌的VEGF活性、下調(diào)VEGF的表達(dá)、阻止VEGF受體信號(hào)途徑，使腫瘤生長(zhǎng)受抑制有關(guān)，提示它具有抗肺癌增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的潛能，有