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文檔簡介
1、目的:運用甘丙肽受體1特異性激動劑M617,探索甘丙肽受體1與骨骼肌細胞GLUT4數(shù)量與膜轉位的關系,了解該受體與胰島素敏感性之間是否存在內在聯(lián)系,明確甘丙肽受體1、GLUT4和2型糖尿病之間的關系。
方法:選3-4周齡健康SD大鼠,適應性喂養(yǎng)2周后,隨機挑選10只,繼續(xù)標準飼料喂養(yǎng),作為健康對照組,其余改喂高脂飼料。8周后一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)40mg/kg,繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng),建立2型糖尿病大鼠模型。將20只
2、模型鼠,隨機分為2組:糖尿病對照組和糖尿病用藥組,每組10只(雌雄各半)。三組大鼠每天分別腹腔注射M617或生理鹽水,一共20天。實驗前后稱體重,實驗后用快速血糖儀測定空腹血糖,ELISA法測定血清胰島素濃度、甘丙肽濃度和骨骼肌勻漿液中GLUT4含量,高胰島素-正葡萄糖鉗方法了解大鼠胰島素敏感性,Western blot法了解大鼠骨骼肌勻漿液中葡萄糖轉運蛋白4的含量及轉位情況,免疫組化法了解GLUT4蛋白在骨骼肌細胞的分布,Real-t
3、ime PCR法檢測骨骼肌細胞中GLUT4 mRNA的含量。
結果:兩糖尿病組大鼠與健康組大鼠相比,血清甘丙肽濃度升高,血清胰島素濃度升高,胰島素敏感性下降,骨骼肌細胞GLUT4 mRNA表達減少,葡萄糖轉運蛋白4膜轉位減少。糖尿病用藥組與糖尿病對照組相比,血清甘丙肽濃度,骨骼肌細胞GLUT4 mRNA表達和GLUT4蛋白表達總量無明顯變化,胰島素分泌量減少,葡萄糖輸注速率明顯增加即敏感性增加,GLUT4轉位數(shù)量增加,體重
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