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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分
目的:觀察電刺激對(duì)2型糖尿病大鼠(OLETF)骨骼肌細(xì)胞葡萄糖運(yùn)載體4(GLUT4)轉(zhuǎn)位的影響。
方法:取20只OLETF大鼠和20只SD大鼠,分離趾長(zhǎng)伸肌,按照抑制劑和電刺激干預(yù)的不同各分為6組:電刺激組、無電刺激組、LY294002+電刺激組、LY294002組、Compound C+電刺激組、Compound C組。用免疫熒光方法觀察GLUT4在各組骨骼肌細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)膜的分布。
2、 結(jié)果:免疫熒光結(jié)果提示:1.OLETF大鼠各電刺激組骨骼肌細(xì)胞膜上GLUT4分布較相應(yīng)的無電刺激組明顯增多。2.SD大鼠各電刺激組骨骼肌細(xì)胞膜上GLUT4分布較相應(yīng)的無電刺激組也明顯增多。
結(jié)論:電刺激誘導(dǎo)的骨骼肌收縮可促進(jìn)GLUT4轉(zhuǎn)位至細(xì)胞膜,阻斷AMPK或PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路都不能抑制GLUT4的轉(zhuǎn)位。
第二部分
目的:觀察電刺激對(duì)OLETF大鼠骨骼肌細(xì)胞腺苷酸激活的蛋白激酶(AMPK)
3、、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB/Akt)和Ras-絲裂原激活的蛋白激酶(Ras-MAPK)的影響,探討電刺激誘導(dǎo)的骨骼肌收縮促進(jìn)OLETF大鼠骨骼肌細(xì)胞GLUT4轉(zhuǎn)位的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
方法:取8只OLETF大鼠和8只SD大鼠,分離趾長(zhǎng)伸肌,按照是否接受電刺激干預(yù)各分為電刺激組和無電刺激組,每組8個(gè)骨骼肌樣本,用免疫印跡方法(Western blot)測(cè)定骨骼肌中AMPK、PI3K、PKB/Akt、
4、ERK蛋白的表達(dá)和活性變化。
結(jié)果:
1.與無電刺激組相比,OLETF大鼠和SD大鼠電刺激組骨骼肌細(xì)胞AMPK、PI3K、Akt蛋白活性均明顯增加。
2.而ERK蛋白活性在兩組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:運(yùn)動(dòng)既可以激活骨骼肌細(xì)胞AMPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,也可以激活胰島素信號(hào)通路中的PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,從而促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞GLUT4轉(zhuǎn)位和葡萄糖攝取。
第三部分
5、r> 目的:觀察AMPK抑制劑和P13K抑制劑對(duì)電刺激激活的骨骼肌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,分析AMPK和P13K在電刺激促進(jìn)骨骼肌GLLJT4轉(zhuǎn)位過程中的作用。
方法:取20只OLETF大鼠和20只SD大鼠,分離趾長(zhǎng)伸肌,按照抑制劑和電刺激干預(yù)的不同各分為6組:電刺激組、無電刺激組、LY294002+電刺激組、LY294002組、Compound C+電刺激組、Compound C組。用western blot法測(cè)定骨骼
6、肌中AMPK、PI3K、PKB/Akt蛋白的表達(dá)和活性變化。
結(jié)果:
1.OLETF大鼠和SD大鼠LY294002+電刺激組骨骼肌細(xì)胞AMPK蛋白活性較LY294002組明顯增加。
2.而Compound C+電刺激組骨骼肌細(xì)胞PI3K、Akt蛋白活性較Compound C組也明顯增加。
結(jié)論:電刺激誘導(dǎo)的骨骼肌收縮可以激活A(yù)MPK和PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,并促進(jìn)GLUT4轉(zhuǎn)
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