Aiolos基因及去乙?；刚{(diào)節(jié)在哮喘發(fā)病機(jī)制中作用的研究.pdf

1、目的：探討淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子Aiolos基因mRNA的表達(dá)水平與支氣管哮喘發(fā)病的關(guān)系，并且比較組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑——曲古抑菌素A(TSA)及具有HDAC增強(qiáng)作用的地塞米松(Dx)對(duì)哮喘小鼠治療作用的差異，深入探討去乙?；刚{(diào)節(jié)在哮喘Th2細(xì)胞抗凋亡能力增強(qiáng)導(dǎo)致哮喘炎癥中的Th1/Th2型細(xì)胞因子失衡、粘液高分泌及氣道重塑等主要改變中分子免疫學(xué)機(jī)制的作用。 方法：在第一部分研究中我們選取33例哮喘患者及38例健康對(duì)照

2、者，采用Trizol-氯仿方法提取外周血總mRNA，應(yīng)用SYBR Green熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法，以3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)基因作為內(nèi)參照基因，采用比較平均循環(huán)數(shù)值(Ct值)法測(cè)定mRNA的相對(duì)表達(dá)水平，并以△Ct值表示，△Ct值=Aiolos Ct值-GAPDH Ct值，比較兩組Aiolos基因mRNA的表達(dá)水平的差異。 第二部分研究選用BALB/C小鼠，通過(guò)卵清蛋白致敏及滴鼻激發(fā)后造成哮喘模型；Dx治療組每次激發(fā)

3、前30分鐘Dx1.5mg/kg（0.2 ml)腹腔注射；TSA 治療組1mg/kg（0.2 ml)腹腔注射，末次激發(fā)24小時(shí)后測(cè)定肺功能，血漿及左肺肺泡灌洗液(BALF)上清用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定IL-4以及IFN-γ，血細(xì)胞及BALF沉淀Wright-Gierma嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，右上肺組織病理切片，觀察病理改變。 結(jié)果：第一部分結(jié)果顯示哮喘組Aiolos基因的△Ct值為5.29±2.29，健康對(duì)照組△Ct值3.4

4、5±4.99，Aiolos基因在支氣管哮喘患者外周血中的表達(dá)水平顯著低于正常人(P值=0.046)。 第二部分結(jié)果顯示TSA及Dx均能顯著減輕小鼠的焦躁不安、呼吸急促等哮喘反應(yīng)，改善氣道高阻力及低順應(yīng)性(P<0.05)，TSA對(duì)于肺功能的改善值優(yōu)于Dx(但組間差異P>0.05)。TSA抑制BAL中淋巴細(xì)胞增生的作用弱于Dx(P<0.05)。Dx以及TSA均能顯著抑制哮喘小鼠Th2型細(xì)胞因子IL-4的分泌，但都缺乏升高IFN-γ的