2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩51頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:檢測弓形蟲感染誘導(dǎo)宿主細(xì)胞自噬的程度,研究細(xì)胞自噬在弓形蟲增殖復(fù)制中的作用。
  方法:對使用自噬抑制劑、誘導(dǎo)劑作用后不同時(shí)間點(diǎn)的弓形蟲感染復(fù)制動(dòng)力學(xué)檢測以及形態(tài)檢測,判斷自噬在弓形蟲增殖復(fù)制過程中的作用。昆明小鼠(雌鼠,5-7周齡,體重16-20g)用于RH株(弓形蟲強(qiáng)毒株)的保種和實(shí)驗(yàn)。將RH株腹腔注射感染小鼠平均4-5天發(fā)病無菌抽取腹水純化弓形蟲計(jì)數(shù)后感染HEF細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分組如下:①正常對照組(HEF細(xì)胞)②R

2、H株+HEF細(xì)胞③自噬抑制劑+RH株+HEF細(xì)胞④自噬誘導(dǎo)劑+RH株+HEF細(xì)胞。分別用自噬抑制劑Bafilomycin A1及自噬誘導(dǎo)劑氯化鋰作用于HEF細(xì)胞,然后將弓形蟲(RH株)速殖子懸液分別以蟲/細(xì)胞2:1、4:1、8:1、16:1感染HEF細(xì)胞,作用1h、2h、4h、8h、24h、48h、96h。將計(jì)數(shù)后的HEF細(xì)胞于六孔板中培養(yǎng)待細(xì)胞爬片貼壁后分別進(jìn)行Giemsa染色和吖啶橙熒光染色,于24孔板中進(jìn)行MDC(Monodans

3、ylcadaverin)熒光染色。采用吖啶橙熒光染色和MDC熒光染色檢測HEF細(xì)胞自噬情況,采用Giemsa染色檢測不同時(shí)間點(diǎn)的弓形蟲感染復(fù)制動(dòng)力學(xué)。通過建立弓形蟲感染的小鼠模型,分別使用自噬抑制劑巴弗洛霉A1(bafilomycin A1)和自噬誘導(dǎo)劑氯化鋰對弓形蟲感染小鼠模型進(jìn)行了干預(yù),應(yīng)用熒光定量PCR檢測不同實(shí)驗(yàn)條件下弓形蟲的增殖情況。
  結(jié)果:弓形蟲增殖觀察:Giemsa染色觀察弓形蟲速殖子在細(xì)胞內(nèi)的寄生:隨機(jī)鏡檢10

4、0個(gè)細(xì)胞,檢測不同時(shí)間蟲體的侵襲率和胞內(nèi)平均增殖數(shù),侵襲率=侵襲的細(xì)胞數(shù)/100×100%、胞內(nèi)平均增殖數(shù)=各細(xì)胞內(nèi)蟲體數(shù)量總和/被侵襲的細(xì)胞數(shù)×100%。吖啶橙和MDC熒光染色用以觀察判斷細(xì)胞自噬過程的發(fā)生情況。吖啶橙和MDC熒光染色結(jié)果表明自噬抑制劑Bafilomycin A1及自噬誘導(dǎo)劑氯化鋰可分別抑制和促進(jìn)HEF細(xì)胞自噬,Giemsa染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用自噬誘導(dǎo)劑氯化鋰可以促進(jìn)弓形蟲在HEF細(xì)胞內(nèi)的增殖,使用自噬抑制劑Bafilom

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論